| 研究課題/領域番号 |
05807022
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
細菌学(含真菌学)
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| 研究機関 | 杏林大学 (1994)
東海大学 (1993) |
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研究代表者 |
神谷 茂 杏林大学, 医学部, 教授 (10177587)
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| 研究分担者 |
山口 博之 杏林大学, 医学部, 助手 (40221650)
白井 孝之 東海大学, 医学部, 助手 (70196591)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1994年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1993年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | Helicobacter pylori / 細胞傷害毒素 / 慢性胃炎 / 消化性潰瘍 / 分離培養 / ウレアーゼ / 細胞付着性 / フローサイトメーター / 赤血球凝集活性 / 細胞傷害性毒素 |
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| 研究概要 |
Helicobacter pylori感染と胃十二指腸疾患発症との関連性を調べるために、胃十二指腸疾患患者より本菌の分離を試みた。胃潰瘍、十二指腸潰瘍、萎縮性胃炎患者からの本菌検出率は各々83、85、75%であり、急性表層性胃炎(25%)、粘膜下腫瘍(33%)患者のそれらに比べて高率であった。胃生検材料のウレアーゼテストの培養法に対する感度、特異性、陽性および陰性予知率は各々76、85、91、63%であり、本テストは迅速スクリーニングテストとして有用であることが判明した。定量培養の結果、1生検材料あたり5,000-1,000CFUのH.pyloriが存在するとウレアーゼテストが陽性となることが示唆された。
H.pylori の約半数の菌株は培養細胞の空胞化を引き起こす細胞障害毒素 cytotoxin(CT)を産生する。CTは70℃で易熱性な分子量2万以上の蛋白であることが明らかにされた。50%硫安塩析後、セファクリルS300ゲル濾過、フェニルスーパーロース疎水結合カラム、Qセファロース FFおよびモノQ陰イオン交換カラム等によりCTの高度精製を試みたが成功に到らなかった。H.pylori 33菌株のCT産生性を検討した。ウサギ腎(RK13)、ヒト羊膜上皮(FL)、サル腎(Vero)、ハムスター腎(BHK-21)、ヒト子宮癌(HeLa)細胞を指示細胞とした場合のCT検出率は各々73、61、27、27、21%であり、CT検出細胞としてRK-13細胞が優れていることが明らかとなった。
H.pylori 15菌株のMKN45、KATO III(いずれもヒト胃癌由来)およびInt-407(ヒト小腸上皮由来)細胞への付着性をフローサイトメーターにより解析した。被検15菌株のMKN45、KATO III、Int-407への平均付着率はそれぞれ76.6、42.7、15.1%であり、H.pyloriは、小腸由来細胞よりも胃上皮由来細胞に対して強い親和性を有し、特にMKN45細胞に対して強い付着性をもつことが示された。CT産生性と付着率の間に有意な相関は認められなかった。
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