| 研究課題/領域番号 |
05807171
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
形態系基礎歯科学
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| 研究機関 | 岩手医科大学 |
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研究代表者 |
金子 克 岩手医科大学, 歯学部, 教授 (60048270)
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| 研究分担者 |
根本 優子 岩手医科大学, 歯学部, 助手 (10164667)
佐々木 実 岩手医科大学, 歯学部, 講師 (40187133)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1994年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1993年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | Streptococcus pyogenes / Streptococcus anginosus / Streptococcal pyrogenic exotoxin / スーパー抗原 / サイトカイン / マイトジェニックファクター / 歯周炎 / Streptococcal pyrogenic exotoxi |
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| 研究概要 |
Streptococcus pyogenesが産生するスーパー抗原Streptococcal pyrogenic exotoxin(SPE)について、ヒト末梢血リンパ球に対する幼若化作用、サイトカイン産生、サイトカインmRNA発現およびT細胞TCRのVβ特異性を検討した。さらに、7種類の口腔レンサ球菌(Streptococcus anginosus、S.sanguis、S.salivarius、S.mitis、S.constellatus、S.gordonii、S.intermedius)についてマイトジェニックファクター(MF)産生のスクリーニングを行い、スーパー抗原やMFと歯周炎の関連性について検討した。
【結果】1.SPEの精製:(1)S.pyogenes培養上清から、イオン交換カラムクロマトグラフィー、ゲル濾過によりSPEBを単一に精製し、精製慓品でウサギを免疫して抗体を作製した。この抗体を用いて、SPEB 1ng/mlの感度で測定できるELISAを確立した。(2)SPEAとSPECについては、グルタチオンSトランスフェラーゼ融合タンパクとして、大腸菌で発現させ精製した。これら精製標品でウサギを免疫して抗体を作製し、ウエスタンブロットで検出できる系を確立した。
2.rSPEA、SPEB、rSPECのスーパー抗原活性について:ヒト末梢血リンパ球に対する幼若化作用およびサイトカイン(TNF、IL-2)の産生を認めた。また、RT-PCRによるVβ特異性の検討から、Vβ2を有するT細胞の増殖を認めた。サイトカインmRNA発現の誘導はTNF-α、TNF-β、IL-2、IFNγに認められた。
3.口腔レンサ球菌からのMFの検出と部分精製:口腔レンサ球菌のうちS.anginosus の培養上清にMFの存在を認め、SPEBの精製法に準じて部分精製した。このMFは、ヒトPBMCを幼若化し、サイトカイン(TNF、IL-2)mRNA発現を誘導し、サイトカイン産生を促進することを明らかにした。
【考察】咽頭や歯周ポケットなどから分離されるS.pyogenesやS.anginosusは、スーパー抗原あるいはMFを産生して、種々の免疫細胞から炎症性サイトカインを産生し、歯周炎を引き起こす可能性が示唆された。
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