| 研究課題/領域番号 |
05808076
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
神経化学・神経薬理学
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
反町 勝 鹿児島大学, 医学部, 教授 (70036440)
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| 研究分担者 |
山神 和比己 鹿児島大学, 医学部, 助手 (30041354)
赤池 紀生 (赤池 紀主) 九州大学, 医学部, 教授 (30040182)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| 研究課題ステータス |
完了 (1994年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1994年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1993年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | 毛様体神経節細胞 / ニコチン / ムスカリン / カルシウム / Na / fura-2 / SBFI / カルシウムチャネルアンタゴニスト / 毛様体神経節 / Calciun / sodium / patch clamp / 細胞内Ca^<2+> / ニコチン様受容体 / ムスカリン様受容体 / 電位依存性Caチャンネル |
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| 研究概要 |
鷄胚(胎生9・12日)より毛様体神経節細胞を急性に単離し、細胞内Ca^<2+>濃度([Ca]_<in>)、Na^+濃度([Na]_<in>)をそれぞれfura-2、SBFIを用いた顕微蛍光法により、またイオン電流はニスタチンperforated patch clamp法により測定した。ニコチン刺激は、一過性の電流を引き起こし、同時に[Na]_<in>を上昇させたが、これらの反応は種々のニコチン様受容体チャネル阻害剤により抑制された。また、[Ca]_<in>上昇は、L-およびN-タイプのCa^<2+>チャネル阻害剤により抑制されたことより、受容体チャネルを通過するNa^+を介した膜電位の脱分極によるCa^<2+>チャネルの活性化が[Ca]_<in>の因と示唆された。しかし、外液のNa^+を除去し脱分極を抑制した条件下で、Ca^<2+>濃度を10mMに増加させるとニコチンによる[Ca]_<in>上昇反応は有意に観察され、この反応はニコチン様受容体チャネル阻害剤により抑制された。従って、受容体チャネルをNa^+のみならずCa^<2+>も一部流入することが証明された。また、これらの反応はαブンガロトキシン抵抗性であることからα7でなくα3β4のサブユニットからなる受容体が関与すると推定した。他方、ムスカリン刺激によるCa^<2+>流入は、(1)ムスカリン刺激が[Na]_<in>を変化させないこと、(2)rampvoltage法による電流-電圧関係がムスカリンの有無により異なること、(3)緩徐なムスカリン電流は膜コンダクタンスの減少を伴うこと、(4)[Ca]_<in>反応は外液Na^+除去により減弱すること、(5)外液Na^+除去下で残存する[Ca]_<in>反応は、細胞内プールからのCa^<2+>放出を抑制するタプシガルギンより消失すること、の結果からM電流を阻害した結果生ずる脱分極および細胞内Ca^<2+>放出の両者を介することが判明した。
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