出芽酵母におけるストレスで誘導される遺伝子の解析

• 研究課題/領域番号: 06261226
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 磯野 克己 神戸大学, 理学部, 教授 (70011640)
• 研究期間 (年度): 1994
• 研究課題ステータス: 完了 (1994年度)
• 配分額: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 1994年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 出芽酵母 / 整列クローン / ストレス応答遺伝子 / 増殖の定常期 / グルコース飢餓 / 遺伝子破壊

研究概要

出芽酵母の第6染色体の整列クローンバンクを利用し,熱ショック,グルコース非存在下での培養,および増殖の定常期のストレス条件下で転写活性の変化する遺伝子を多数同定した。それらの遺伝子のいくつかの塩基配列を決定し,予想されるアミノ酸配列のホモロジー解析,転写開始点の決定,遺伝子破壊などにより解析した。これらの遺伝子のうち,アミノ酸の代謝に関与しているL-アラニン・グリオキシル酸アミノ転移酵素の遺伝子(AGT1)と類似しているVI-A,および,グルコースによって抑制されるものと誘導される遺伝子が交互に並ぶ領域中でもっとも変化の激しいVI-61の二つの遺伝子について詳細に解析した。両遺伝子は酵母の生育にとって必須ではない。両遺伝子の上流部をlacZにつなぎ,異なる培養条件下でβ-ガラクトシダーゼの活性を指標としてストレスに応答するシス配列の同定を進めた。また,より一般的にストレスに応答する遺伝子を同定するために,differential hybridization法によってストレス条件下で発現する遺伝子のmRNAを濃縮し,cDNAバンクを作成し,解析を進めていくための手筈を整えた。

研究成果

• [文献書誌] Grohman,L.: "The yeast MRP-L13 gene codes for a protein of the large subunit of the mitochondrial" Current Genetics. 26. 8-14 (1994)
• [文献書誌] Kasai,H.: "Use of trans-poson,PCR and magnetic beads for the genome analysis of E.coli K-12:Further improvements of the method and analysis of the terC region." Proceedings of JBA Symposium on Microorganism DNA. 1. 37-46 (1994)
• [文献書誌] Abe,R.: "Cloning and characterzation of the ribosomal protein genes in the spc operon of a prokaryotic endosymbiont of the pea aphid,Acyrthosiphon kondoi." DNA Research. 1. 103-114 (1994)
• [文献書誌] Isono,K.: "Characteristic features of the nucleotide sequences of yeast mitochondrial ribosomal protein genes as analyzed by computer program GeneMark." DNA Research. 1. 263-269 (1994)
• [文献書誌] Moriya,H.: "Cloning and characterization of the hrpA gene in the terC region of Escherichia coli that is highly similar to the DEAH family RNA helicase genes of Saccharomyces cerevisiae" Nucleic Acids Research. (印刷中). (1995)
• [文献書誌] Berg,C.M.: "Automated Sequencing and Analysis pp.51-59." Adams,M.D.et al.eds.,Academic Press, (1994)
• [文献書誌] Kasai,H.: "Advances in Biomagnetic Separation pp.113-125." Uhlen,M.et al.eds.,Eaton Publishing, (1994)