転写調節機構の解析-調節因子と基本因子との相互作用を中心とした解析-

• 研究課題/領域番号: 06280206
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 堀越 正美 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (70242089)
• 研究分担者: 葛原 隆 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (00260513) ; 山本 融 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (10251480)
• 研究期間 (年度): 1995
• 研究課題ステータス: 完了 (1995年度)
• 配分額: 20,000千円 (直接経費: 20,000千円); 1995年度: 10,000千円 (直接経費: 10,000千円); 1994年度: 10,000千円 (直接経費: 10,000千円)
• キーワード: 転写調節因子 / 転写基本因子 / 相互作用 / 癌遺伝子 / 転写調節 / 転写活性化 / TFIID / two-hybrid法

研究概要

(1)ヒトTFIIDサブユニットをコードするcDNAの単離とその解析
ヒストン相同性を持つヒトTFIIDサブユニットをコードするcDNAを4種単離した。それらのTFIIDサブユニットと他のTFIIDサブユニットや基本因子群との相互作用も解析した。
(2)TFIIDサブユニットをコードするcDNAの様々な種からの単離
構造・活性相関解析などの実験を考慮し、TFIIDサブユニットをコードするcDNAを様々な種から多数単離した。
(3)転写基本因子群をコードするcDNAの単離
転写基本因子群の構造活性相関の解析を進める目的で様々な種から転写基本因子群をコードするcDNAの単離を行った。
(4)TFIIEサブユニットの構造・活性相関解析
転写基本因子TFIIEの様々な欠失蛋白質を作製し、基本転写活性やTFIIH依存のリン酸化活性制御能を指標に構造・活性相関解析を行った。
(5)転写調節因子による転写不活性化機構の解析
H-2K^bクラスI遺伝子やc-erbB-2遺伝子の転写を抑制する分子機構を明らかにする目的で解析を行い、TATAボックスの転写抑制機構における重要性を指摘した。
(6)組織特異的な転写伸長因子S-IIをコードするcDNAの単離
S-IIの組織特異的な機能解析を行う目的で精巣・卵巣特異的ヒトS-IIをコードするcDNAを単離した。総合的な解析を進めるためにマウス、ラットからもS-II因子族3種のcDNAを単離した。

研究成果

• [文献書誌] X.Tang et al.: "Cooperativity between an upstream TATA-like sequence and a CAA repeated element mediates E1A-dependent negative repression of the H-2K^bclass lgene" J.Biol.Chem.270. 2327-2336 (1995)
• [文献書誌] G.Mizuguchi et al.: "c-Myb repression of c-erbB-2 transcription by direct binding to the c-erbB-2 promoter" J.Biol.Chem. 270. 9384-9389 (1995)
• [文献書誌] D.-W.Dong et al.: "Molecular cloning of cDNA encoding the small subunit of Drosophila transcription initiation factor TFIIF" Nucleic Acids Res.23. 1882-1886 (1995)
• [文献書誌] K.Hisatake et al.: "Evolutionary conservation of human TATA-binding-polypeptide-assoclated factors TAFII31 and TAFII80 and interactions ofTAFII80 with other TAFs and with general transcription factors" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.92. 8195-8199 (1995)
• [文献書誌] T.Ohkuma et al.: "Analysis of the role of TFIIE in basal transcription and TFIIH-mediated carboxy-terminal domain phosphorylation through structure-function studies of TFIIE-α" Mol.Cell.Biol.15. 4856-4866 (1995)
• [文献書誌] T.Umehara et al.: "Isolation and characterization of a cDNA encoding a new type of human transcription elongation factor S-II" Gene. 167. 297-302 (1995)
• [文献書誌] T.Kokubo,et al.: "Molecular cloning of Drosophila TFIID subunits" Nature. 367. 484-487 (1994)
• [文献書誌] T.Kokubo,et al.: "Interaction between the N-terminal domain of the 230-kDa subunit and the TATA box-binding subunit of TFIID negatively regulates TATA-box binding" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.91. 3520-3524 (1994)
• [文献書誌] T.K.Kim,et al.: "Effects of activation-defective TBP mutations on transcription initiation in yeast" Nature. 369. 252-255 (1994)
• [文献書誌] G.Mizuguchi,et al.: "Independent control of transcription initiations from two sites by an initiator-like element and TATA box in the human c-erbB-2 promoter" FEBS Lett.348. 80-88 (1994)
• [文献書誌] F.Saito,et al.: "Direct mapping of the human TATA box-binding protein (TBP) gene to 6q27 by fluorescence in situ hybridization" Jpn.J.Human Genet.39. 421-425 (1994)