多剤耐性遺伝子の関与しない抗癌剤の感受性を左右する因子の解明に関する研究

• 研究課題/領域番号: 06282268
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 西條 長宏 国立がんセンター, 薬効試験部, 部長 (00215526)
• 研究分担者: 平家 勇司 国立がんセンター, 薬効試験部, 研究員 (90260322) ; 西尾 和人 国立がんセンター, 薬効試験部, 研究員 (10208134)
• 研究期間 (年度): 1994 – 1995
• 研究課題ステータス: 完了 (1994年度)
• 配分額: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円); 1994年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
• キーワード: 抗がん剤 / 多剤耐性

研究概要

P糖蛋白の関与しない多剤耐性機構を分子レベルで明らかにする事を究極の目的とした。細胞のリン酸化の状態が薬剤感受性に関わりもつ事実は従来から散発的にはあるものの直接的な証明は乏しい。本研究ではPKCのactivatorであるTPAと、phosphataseのinhibitorのokadaic acid(OA)に対する耐性株を樹立しその特性を分析するとともに克服法の開発を試みた。
1.TPA耐性K562細胞(K562/TPA)はP糖蛋白の関与しない多剤耐性細胞であり、細胞内薬剤蓄積の低下はみられない。K562/TPAではアドリアマイシン(ADM)は主に細胞質へ分布し核にはわずかに認められたにすぎなかった。チロシンキナーゼ阻害剤genisteinにより抗癌剤のK562/TPAに対する細胞傷害能は上昇するとともに細胞内へのADMの蓄積も増加した。又ADMなどによるDNAの単鎖切断も増加し、genisteinにより薬剤耐性を克服しうると示唆された。シグナル伝達機構に作用する物質が薬剤耐性を修飾しうる事実は、耐性克服に重要な示唆をもたらした。
2.抗癌剤耐性細胞はprotein phoshatase(PP)阻害剤であるokadaic acid(OA)に対しても耐性化した。OAに対する耐性機構を解明するため、肺小細胞癌株H69よりOA耐性株(H69/OA)を樹立した。H69/OAにおけるPP活性は有意に低く、PP(PP1,PP2Aとも)はOAによる抑制に対し抵抗性を示した。OAによるH69/OA100のp34^<cdc2>kinaseの脱リン酸化は、抑制されていた。OAによるG2/M blockはPP阻害を介したp34^<cdc2>kinaseのtyrosine residueへの作用によって誘導されると示唆された。H69/OA100ではOAによるp34^<cdc2>kinaseのtyrosine residueの脱リン酸化が阻害されるためG2/M blockがおこらないと示唆された。PPは細胞周期の調節に重要な役割を果していると示された。

研究成果

• [文献書誌] Kubo,S.O.: "Apoptosis induced by etoposide small-cell lung cancer cell lines.Cacct Chemother." Pharmacol.33. 385-390 (1994)
• [文献書誌] Kubota,N.: "Characterization of an etoposide-resistant human ovarican cancer cell line." Cancer Chemother.Pharmacol.34. 183-190 (1994)
• [文献書誌] Ohmori,T.: "Ouabain resistant non-small-cell lung cancer cell line shows collateral sensitivity to cisdiamminedichloroplatinum(II)(CDDP)." Int.J.Cancer. 57. 111-116 (1994)
• [文献書誌] Ogasawara,H.: "KW-2189,a novel cyclopropylpyrroloindole,is activated by carboxyl esterase and induces DNA-strand breaks." Jpn.J.Cancer Res.85. 418-425 (1994)
• [文献書誌] Takeda,Y.: "Reversal of multidrug resistance by tyrosine-kinase inhibitors in a non-p-glycoprotein-mediated multidrug-resistant cell line." Int.J.Cancer. 57. 229-239 (1994)
• [文献書誌] Ohta,S.: "Characterization of a taxol-resistant human small-cell lung cancer cell lines." Jpn.J.Cancer Res.85. 290-297 (1994)
• [文献書誌] Yang,Y.,Woo,E.: "Human metallothionein isoform gene expression in cisplatin-sensitive and resistant cells." Molecular Pharmacol.45. 453-460 (1994)
• [文献書誌] Oshita,F.: "Rapid polymerase chain reaction assay to detect variation in the extent of gene-specific damage betweem cisplatin-or Vp-16-resistant and sensitive lung cancer cell lines." Jpn.J.Cancer Res.85. 669-673 (1994)
• [文献書誌] Takeda,Y.: "Establishment of aHuman Small-Cell Lung-Cancer Subline Resistant to Okadaic Acid." Int.J.Cancer.58. 882-890 (1994)
• [文献書誌] Kondo,H.: "In vitro and in vivo effects of cisplatin and etoposide in combination on small cell lung cancer cell lines." Jpn.J.Cancer Res.85. 1050-1056 (1994)
• [文献書誌] Kjima,T.: "Establishment of CPT-11 resistant human ovarian cancer cell Line." Anticancer Res.14. 799-804 (1994)
• [文献書誌] Saijo,N.: "7-Ethyl-10〔4-(1-piperidino)-1-piperidino〕carbonylowy camptothecin;mechanism of resistance and clinical trials." Cancer.Chemother.Pharmacol.34. 112-117 (1994)
• [文献書誌] Bojanowski,K.: "Effect of suramin on p34^<cdc2>kinase in vitro and in extracts from human H69 cells:evidence for a double mechanism of action." Biochem.Bioph.Res.Commun.203. 1574-1580 (1994)
• [文献書誌] Nishio,K.: "Genistein,a tyrosine Kinase Inhibitor,Decreased the affinity of p56^<lek>to β-chain of interleukin-2receptor in human natural killer(NK)-rich cells and decreased NK-mediated cytotoxicity(43811)." PSEBM. 207. 227-233 (1994)
• [文献書誌] Nishio,M.: "Overexpression of cisplatin-inducible proteins that are recognized by anti-HMG antibody in cisplatin-resistant human lung cancer cell line." Cellular Pharmacol.1. 251-255 (1994)
• [文献書誌] Kunikane,H.: "Flow cytometric analysis of cellular adriamycin accumulation in small-cell lung cancer cell lines:correlation of P-glycoprotein expression,cytotoxicity and intracellular distribution." Cellular Pharmacol.1. 293-300 (1994)