| 研究課題/領域番号 |
06453166
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
応用微生物学・応用生物化学
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
塚越 規弘 名古屋大学, 農学部, 教授 (50115599)
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| 研究分担者 |
加藤 雅士 名古屋大学, 農学部, 助手 (70242849)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
7,300千円 (直接経費: 7,300千円)
1995年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
1994年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円)
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| キーワード | 糸状菌遺伝子の発現特性 / Aspergillus oryzae / Aspergillus nidulans / タカアミラーゼA / CCAAT / CREA / 転写活性化因 / マルトース結合タンパク質 / 糸像菌遺伝子の発現特性 / Appergillus oryzae / 転写活性化因子 / タカアミラーゼ / A.oryzae / A.nidulans / Repressor / Activator |
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| 研究概要 |
麹菌に代表される糸状菌は我国の醗酵工業の基盤を形成した極めて重要な真核微生物群である。本研究は麹菌Aspergillus oryzaeの生産するタカアミラーゼAの遺伝子をモデル系として、その誘導発現に関わる転写促進因子、転写抑制因子および誘導物質マルトースのシグナル受容機構を分子レベルで解明し、糸状菌における遺伝子の高度利用を目的としている。これまでにAspergillus oryzae JCM 02239からタカアミラーゼAの染色体遺伝子を2種類と全鎖長のcDNAを分離し、塩基配列の決定などから遺伝子構造の特色を明らかにした。また、タカアミラーゼA遺伝子のAspergillus nidulans形質転換株を取得し、各種培養条件下でタカアミラーゼA遺伝子の発現特性を解析し、プロモーター領域に存在するCCAAT配列並びにCREAタンパク質の結合配列が転写制御に重要な役割を担っていることを明らかにしている。
本研究においてはCCAAT配列結合タンパク質(AnCP)の特性を解析するとともにRepressorタンパク質の一つであるCREAタンパク質のin vivoにおける役割を解析した。また、AnCPタンパク質を核から分離精製することを試みた。AnCPはタカアミラーゼA遺伝子上のCCAAT配列のみならず、アセトアミダーゼS遺伝子やGABAトランスアミナーゼ遺伝子上のCCAAT配列にも結合でき、AnCP因子はA.nidulansにおける一般的な転写促進因子であることを解明した。本因子の遺伝子をSouth-Western法やヒトに由来するCCAAT結合タンパク質遺伝子NF-YAcDNAをプローブにした方法によりクローン化を試みているが成功していないが、AnCPタンパク質を核タンパク質から各種カラムを使用して分離することを試みている。CREAタンパク質による転写抑制解除を目的として結合配列を変化させた遺伝子の構築し、カタボライト抑制がどのようになるかを解析中である。また、タカアミラーゼA遺伝子の誘導発現に関わると予想されるマルトース結合タンパク質の分離も試みている。
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