| 研究課題/領域番号 |
06454368
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 島根医科大学 |
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研究代表者 |
仁尾 義則 島根医科大学, 医学部, 助教授 (20208119)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
7,500千円 (直接経費: 7,500千円)
1995年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1994年度: 6,000千円 (直接経費: 6,000千円)
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| キーワード | 人工膵臓 / 糖尿病 / 遺伝子治療 / インシュリン / 細胞工学 / Diffusion chamber / 人工β細胞 / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
平成6年度においては、以下の結果が得られた.
1.ヒト正常膵部分によりRT-PCR法によりproinsulin遺伝子を増幅、分離、精製し、neomycin耐性遺伝子をもつeukaryotic expression vectorに組み込み、CHO細胞株にカチオン性油脂法にて導入し、proinsulin遺伝子発現細胞株(CHO/l)をクローニングしえた。
2.CHO/lを継代培養し、培養液中にimmuno-reactive insulinの分泌を認めた。
平成7年度は、CHO/l細胞株をDiffusion chamberに封入したhybrid型人工膵臓を開発し、90%膵切除にて作成した糖尿病ラットの腹腟内に移植し、以下の結果を得た。
1.microcarrier beads上でCHO/l細胞を大量培養し、0.2μmのmembrane filterを用いたdiffusion chamber中に封入し、人工膵臓を作成した。
2.このdiffusion chamberを90%膵切除にて作成した糖尿病ラットの腹腟内に移植した。
3.90%膵切除ラットでは通常空腹時血糖がが300mg/dl以上となり、体重も減少するのに対し、空腹時血糖値の正常化をみ、また体重も順調に増加した。
以上、ヒトインシュリン遺伝子導入人工β細胞封入diffusion chamberを用いた人工膵臓のモデルを作成しえた。
以上の結果は、第30回日本移植学会総会シンポジウム(1994.11)、第45回日本消火器外科学会総会ワークショップ10(1995.2.)、第31回日本移植学会総会ワークショップ2(1995.9.)において報告した。
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