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血管内皮・平滑筋細胞機能を細胞分子レベルで生体連続観察できるシステムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 06557045
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分試験
研究分野 循環器内科学
研究機関九州大学

研究代表者

金出 英夫  九州大学, 医学部, 教授 (80038851)

研究分担者 西村 淳二  九州大学, 医学部, 助教授 (90237727)
小林 誠  九州大学, 医学部, 助教授 (80225515)
研究期間 (年度) 1994 – 1996
研究課題ステータス 完了 (1996年度)
配分額 *注記
12,300千円 (直接経費: 12,300千円)
1996年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1995年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1994年度: 8,000千円 (直接経費: 8,000千円)
キーワード血管内皮 / 血管平滑筋 / 生体計測 / 細胞質カルシウム / フラ-2 / フラ-ス
研究概要

1.開発した「血管内皮・平滑筋細胞機能を細胞分子レベルで生体連続観察できるシステム」の特徴:(1)回折格子で得られる2つの励起光(340、380nm)の切替照射に、ステッピングモーターによるチョッパーミラーの回転方式を採用することによって、比較的高速(10Hz)の2波長切替と無振動測定が可能となった。(2)チョッパー切替装置の制御は画像処理装置を用いた。(3)画像取り込みにSITカメラを採用し、画像処理装置のフレームおよび拡張メモリーを用いることによって、640x400ドットの8ビット(256階調)画像フレームを得ることができた。(4)細胞内の〔Ca〕i濃度分布像について、256階調の〔Ca〕i濃度レベルを疑似カラーで表示可能となった。この画像は、5Hzで得ることができるようになった。(5)画像中の30局所の変化を連続記録できる。(6)廉価。
2.本システム、およびこれまで開発してきたfront-surface fluorimetryを利用し、次のような研究成果を挙げた。(1)in situ豚大動脈弁の内皮細胞に光学的方法を応用し、〔Ca〕i(フラ-2蛍光)と一酸化窒素-NO(diaminonaphthalene蛍光)の同時測定法を完成した。(2)冠動脈および賢動脈において、エンドセリンやアドレノメジュリン(AM)の産生と機能について検討した。これらの標本にReverse transcription polymerase chain reaction法を応用し、これら活性物質の産生に関わる蛋白のmRNAの発現を証明した。冠動脈および賢動脈においては、これらの活性物質がオートクリン/パラクリン型の血管緊張調節機能を有することを明らかにした。
3.Humana Pressが刊行中のMethods in Molecular Biologyのシリーズの一つとして、われわれが開発したfront-surface fluorimetry法を紹介する論文の執筆依頼があった。近々、印刷出版の予定。(NJ;U.S.A)。

報告書

(4件)
  • 1996 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1995 実績報告書
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (125件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (125件)

  • [文献書誌] H.Aoki: "Relationship between cytosolic calcium concentration and force in the papaverine-induced relaxation of medial strips of pig" Br J Pharmacol. 111. 489-496 (1994)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Aoki: "Sensitivity of G-protein involved in endothelial-1-induced Ca2+ influx topertussis toxin in porcine endothelial cells" Br J Pharmacol. 111. 989-996 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kobayashi: "Cytosolic Ca2+ transients are not required for platelet-derived growth factor to induce cell cycle progression of" J Biol Chem. 269. 9011-9018 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] X.Chen: "Protein kinase C and protein kinase A regulate the expression of angiotensin II receptor mRNA in smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 267. 175-183 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Abe: "Effects of nicorandil on cytosolic calcium concentrations and on tension development in the rabbit femoral artery." J Pharmacol Exp Ther. 268. 762-771 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Hirakawa: "Actions of a new Ca2+ channel antagonist,CD 832,on two types of Ca2+ channels in smooth muscle." Eur J Pharmacol. 252. 267-274 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Higuchi: "Motilin induces the endothelium-dependent relaxation of smooth muscle and the elevation of cytosolic calcium in" Biochem Biophys Res Commun. 202. 346-353 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Ushio-Fukai: "The effects of a novel vasodilator LP-805,on cytosolic Ca2+ concentrations and on tension in rabbit isolated femoral" Br J Pharmacol. 113. 1173-1182 (1994)

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  • [文献書誌] M.Kodama: "Myosin phosphorylation and Ca2+ sensitization in porcine coronary arterial smooth muscle stimulated with endothelin-1." Eur J Pharmacol. 288. 69-77 (1994)

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  • [文献書誌] M.Ushio-Fukai: "Endothelin-1 and endothelin-3 regulate differently vasoconstrictor responses of smooth muscle of the porcine coronary" Br J Pharmacol. 114. 171-179 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Fukuizumi: "Cytolic calcium concentration-force relation during contractions in the rabbit femoral artery ; time-dependency and" Br J Pharmacol. 114. 329-338 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Hirakawa: "Dual regulation of L-type Ca2+ channels cy serotonin 2 receptor stimulation in vascular smooth muscle cells." Am J Physiol. 268. H544-H549 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Miyagi: "Resting load regulates cytosolic calcium-force relationship of the contraction of bovine cerebrovascular smooth muscle." J Physiol. 484. 123-137 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Miyagi: "Resting load regulates vascular sensitivity by a cytosolic Ca2+-insensitive Mechanism." Am J Physiol. 268. C1332-C1341 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Toyofuku: "Effects of U46619 on intracellular Ca++ concentration and tension in human umbilical artery." Am J Obstet Gynecol. 172. 1414-1421 (1995)

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  • [文献書誌] G.Hiroishi: "High D-glucose stimulates the cell cycle from G1 to the S and M phases,but has no competent effect on the GO phase,in" Biochem Biophys Res Commun. 211. 619-626 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Kureishi: "Adrenomedullin decreases both cytosolic Ca2+ concentration and Ca2+- sensitivity in pig coronary arterial smooth muscle" Biochem Biophys Res Commun. 212. 572-579 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Nishimura: "Evidence for the presence of endothlin ET_A receptors in endothelial cells in situ on the aortic side of porcine" Br J Pharmacol. 115. 1369-1376 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Kuroiwa: "Mechanism of endothelium-dependent relaxation induced by substance P in the coronary artery of the pig." Br J Pharmacol. 116. 2040-2047 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Seguchi: "Autocrine regulation of the renal arterial tone by adrenomedullin." Biochem Biophys Res Commun. 215. 619-625 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Yoshimura: "Effects of midazolam on intracellular Ca2+ and tension in airway smooth muscle." Anesthesiology. 83. 1009-1020 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Jahan: "Endothelin-1 and angiotensin II act as progression but not competence growth factors in vascular smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 295. 261-269 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Abe: "Some effects of nipradilol,a β-blocker possessing a nitroxy group,on smooth muscle of the pig coronary artery." Br J Pharmacol. 117. 1707-1715 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Seguchi: "The mechanism of relaxation induced by atrial natriuretic peptide in the porcine renal artery." Br J Pharmacol. 118. 343-351 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Miyagi: "Dual regulation of cerebrovascular tone by UTP_<2U> receptor-mediated contraction and endothelium-dependent relaxation." Br J Pharmacol. 118. 847-856 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.Sakihara: "Expression of calponin mRNA in porcine aortic endothelial cells." Biochem Biophys Res Commun. 222. 195-200 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Miyagi: "P_<2U> receptor is linked to cytosolic Ca2+ transient and release of vasorelaxing factor in bovine endothelial cells in situ." J Physiol. 492. 751-761 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Miyagi: "P_<2U> purinergic activation leads to the cell cycle progression from the G_1 to the S and M phases but not from the G_0 to G_1" Biochem biophys Res Commun. 222. 652-658 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Fukuizumi: "The effects of calcitonin gene-related peptide on the cytosolic calcium concentration and force in the porcine coronary artery." J Pharmacol Exp Ther. 278. 220-231 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Higuchi: "CPA induces a sustained increase in 〔Ca2+〕i of endothelial in situ and relaxes porcine coronary artery." Am J Physiol. 270. H2038-H2049 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kuga: "Cell cycle-dependent expression of L-and T-type Ca2+ currents in vascular smooth muscle cells." Circ Res. 79. 14-19 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.Sakihara: "The direct inhibitory effect of chlorpromazine on smooth muscle of the porcine pulonary artery." Anesthesiology. 85. 616-625 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Nishimura: "Expression of rhoA and rho kinase mRNAs in porcine vascular smooth muscle." Biochem Biophys Res Commun. 227. 750-754 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kai: "Halothane counteracts acetylcholine-induced increase in Ca2+ sensitivity of the contractile apparatus in airway smooth" Eur Jr Pharmacol. 315. 313-318 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Nishimura: "The relaxant effect of adrenomedullin on particular smooth muscles despite a general expression of its mRNA in smooth" Br J Pharmacol. 120. 193-200 (1997)

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  • [文献書誌] X.Chen: "Resting load modulates the myofilament Ca2+-sensitivity in rabbit cerebral arteries." J Cereb Blood Flow Metab. (in press).

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] G.Hiroishi: "The differential effects of diltiazem and nitroglycerin on cytosolic Ca2+ concentration and on force in the bovine" Invest Opthalmol Vis Sci. (in press).

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] D.Eguchi: "Mechanism of contraction induced by bradykinin in the rabbit saphenous vein." Br J Pharmacol. (in press).

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Niiro: "Up-regulation of RHO A and RHO-kinase mRNAs in the rat myometrium during pregnancy." Biochem Biophys Res Commun. (in press).

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Kanaide: "Endothelium-derived factors and vascular functions" Excerpta Medica, 10 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Kanaide: "Regulation of the contractile cycle in smooth muscle" Springer-Verlag,Tokyo, 12 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Kanaide: "pathophysiology of heart failure" Kluwer Academic Publisher,Boston, 12 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Aoki: "Relationship between cytosolic calcium concentration and force in the papaverine-induced relaxation of medial strips of pig coronary artery." Br J Pharmacol. 111. 489-496 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Aoki: "Sensitivity of G-protein involved in endothelin-I-induced Ca^<2+> influx to pertussis toxin in porcine endothelial cells in situ." Br J Pharmacol. 111. 989-996 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kobayashi: "Cytosolic Ca^<2+> transients are not required for platelet-derived growth factor to induce cell cycle progression of vascular smooth muscle cells in primary culture : actions of tyrosine kinase." J Biol Chem. 269. 9011-9018 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] X.Chen: "Protein kinase C and protein kinase A regulate the expression of angiotensin II receptor mRNA in smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 267. 175-183 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Abe: "Effects of nicorandil on cytosolic calcium concentrations and on tension development in the rabbit femoral artery." J Pharmacol Exp Ther. 268. 762-771 (1994)

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  • [文献書誌] Y.Hirakawa: "Actions of a new Ca^<2+> channel antagonist, CD832, on two types of Ca^<2+> channels in smooth muscle." Eur J Pharmacol. 252. 267-274 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Higuchi: "Motilin induces the endothelium-dependent relaxation of smooth muscle and the elevation of cytosolic calcium in endothelial cells in situ." Biochem Biophys Res Commun. 202. 346-353 (1994)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Ushio-Fukai.: "The effects of a novel vasodilator LP-805, on cytosolic Ca^<2+> concentrations and on tension in rabbit isolated femoral arteries." Br J Pharmacol. 113. 1173-1182 (1994)

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  • [文献書誌] M.Kodama: "Myosin phosphorylation and Ca^<2+> sensitization in porcine coronary arterial smooth muscle stimulated with endothelin-1." Eur J Pharmacol. 288. 69-77 (1994)

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  • [文献書誌] M.Ushio-Fukai: "Endothelin-1 and endothelin-3 regulate differently vasconstrictor responses of smooth muscle of the porcine coronary artery." Br J Pharmacol. 114. 171-179 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Fukuizumi: "Cytosolic calcium concentration-force relation during cntractions in the rabbit femoral artery : time-dependency and stimulus specificity." Br J Pharmacol. 114. 329-338 (1995)

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  • [文献書誌] Y.Hirakawa: "Dual regulation of L-type Ca^<2+> channels by serotonin 2 receptor stimulation in vascular smooth muscle cells." Am J Physiol. 268. H544-H549 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Miyagi: "Resting load regulates cytosolic calcium-force relationship of the contraction of bovine cerebrovascular smooth muscle." J Physiol. 484. 123-137 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Miyagi: "Resting load regulates vascular sensitivity by a cytosolic Ca^<2+> insensitive mechanism." Am J Physiol. 268. C1332-C1341 (1995)

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  • [文献書誌] K.Toyofuku: "Effects of U46619 on intracellular Ca^<2++> concentration and tension in human umbilical artery." Am J Obstet Gynecol. 172. 1414-1421 (1995)

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  • [文献書誌] G.Hiroishi: "High D-glucose stimulates the cell cycle from the G_1 to the S and M phases, but has no competent effect on the G_0 phase, in vascular smooth muscle cells." Biochem Biophys Res Commun. 211. 619-626 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Kureishi: "Adrenomedullin decreases both cytosolic Ca^<2+> concentration and Ca^<2+> -sensitivity in pig coronary arterial smooth muscle." Biochem Biophys Res Commun. 212. 572-579 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Nishimura: "Evidence for the presence of endothelin ET_A receptors in endothelial cells in situ on the aortic side of porcine aortic valve." Br J Pharmacol. 115. 1369-1376 (1995)

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  • [文献書誌] M.Kuroiwa: "Mechanism of endothelium-dependent relaxation induced by substance P in the coronary artery of the pig." Br J Pharmacol. 116. 2040-2047 (1995)

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  • [文献書誌] H.Seguchi: "Autocrine regulation of the renal arterial tone by adrenomedullin." Biochem Biophys Res Commun. 215. 619-625 (1995)

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  • [文献書誌] H.Yoshimura: "Effects of midazolam on intracellular Ca^<2+> and tension in airway smooth muscle." Anesthesiology. 83. 1009-1020 (1995)

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  • [文献書誌] H.Jahan: "Endothelin-1 and angiotensin II act as progression but not competence growth factors in vascular smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 295. 261-269 (1996)

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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