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トウモロコシ幼葉鞘インドールアカトアルデヒド酸化酵素の精製とcDNAクローニング

研究課題

研究課題/領域番号 06640846
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 植物生理
研究機関東京都立大学

研究代表者

小柴 英一 (小柴 共一) (1995)  東京都立大学, 理学部, 助手 (80117704)

小柴 共一 (1994)  東京都立大学, 理学部, 助手 (04680197)

研究期間 (年度) 1994 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1995年度)
配分額 *注記
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1995年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1994年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワードインドール-3-酢酸(IAA) / トリプトファン / インドールアセトアルデヒド / アルデヒド酸化酵素 / トウモロコシ(Zea mays) / 幼葉鞘 / IAA生合成 / モリブデン / トウモロコシ / モルブデン
研究概要

植物におけるIAAの生合成については、その合成経路すら未確定な段階にある。申請者は、トウモロコシ幼葉鞘先端部でIAAがトリプトファンから合成されている可能性を示してきたが、本研究課題では、このIAAの合成に関与している可能性の高い、インドールアセトアルデヒド(IAALd)酸化酵素に注目し、本酵素の精製とcDNAのクローニングにとり組んだ。
その結果 (1)本酵素を電気泳動的にほぼ単一になるまで精製し、その標品よりマウスから特異性の高い抗体を得ることができた。この抗血清を用いた、Westeru blottingにより、本酵素が幼葉鞘の先端部に多く存在することが明らかになった。
(2)本酵素の基質特異性をさまざまなアルデヒドやIAAに関連する物質について検体し、IAALdおよびインドールアルデヒドに対して親和性の高いものであることがわかった。こうしたことからも、本酵素が植物生体的においてIAAの合成に働いている可能性が強く示されている。
(3)精製標品をSDS電気泳動後、得られるメジャーなペプチドについてアミノ酸配列の一部を決定した。この情報に基づきPCR法によってcDNA断片を得た。この断片をもとにおよそ4Kb長(ほぼ全長)のcDNA2種が得られている。現在、全配列の正確な決定をすすめているが、木モロジー検索ではウシのアルデヒド酸化酵素,動物のキサンチンデヒドロゲナーゼとの高い相同性が示されている。この配列は、植物では世界ではじめてのものである。

報告書

(3件)
  • 1995 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Biosynthesis of Indole-3-Acetic Acid from L-Tryptophan in Eoleoptile Fips of Maize(Zea mays L.)" Plant Cell Physiology. 36. 1503-1510 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Transcriptional Regulation of PS-IAA5 and IAA6 Early Gene Expression by Indoleacetic acid…" J.Molecular Biology. 253. 396-413 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Purification and Properties of Flaviu- and Molylodenum-containing Aldehyde Oxidase…" Plant Physiology. 110. 781-789 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Sekimot et al.: "Cloning and Molecular Cheracterization of Plant Aldehyde Oxidase" J.Biol.Chem.(印刷中). (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Biosynthesis of indole-3-acetic acid from L-tryptophane in coleoptite tips of maize (Zea mays L.)" Plant Cell Physiology. 36. 1503-1510 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et.al.: "Transcriptional regulation of PS-ZAA4.5 and PS-IAA6 early gone expression by indoleacetic acid and protein synthesis in hibitors in pea (Pisum Satiuum)." J.Molecular Biology. 253. 396-413 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et.al.: "Purification and properties of flauiu-and molybdeuum-containing aldehyde oxidase from coleophiles of maize." Plant Physiology. 110. 781-789 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Sekimoto et al.: "Cloning and mdecular characterization of plant aldehyde oxidase." J.Biol.Chem.(in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Biosyuthesis of Iudole-3-Acetic Acid from L-Tryptophan in・・・・" Plant Cell Physiology. 36. 1503-1510 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] K.Tazaki et al.: "Expression of cDNA for a bark lectin of Robinia in・・・・" FEBS.LETT.377. 54-58 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Transcriptional regulation of PS-IAA 4/5 and・・・・" J.Mol.Biol.253. 396-413 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] T.Koshiba et al.: "Purification and properties of flavin-and・・・・(in press)" Plant Physiology. 110. (1996)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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