| 研究課題/領域番号 |
06660061
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
植物保護
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| 研究機関 | 秋田県立農業短期大学 |
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研究代表者 |
北川 良親 秋田県立農業短期大学, 附属生物工学研究所, 教授 (10006752)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1995年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 単鎖抗体 / 二本鎖RNA / ウイルス病 / 抗体可変領域 / モノクローン抗体 / 抗体遺伝子 / 核酸 |
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| 研究概要 |
平成6年度に抗二本鎖RNA抗体遺伝子の可変領域VHとVLをPCRよって増幅し、クローニングした。これらの遺伝子は市販キットのプイマ-を用いて作成したが、VHとVLを連結した単鎖抗体遺伝(ScFv)は抗原の二本鎖RNAとの結合活性がなかった。平成7年度は度抗二本鎖RNA抗体産生ハイブリドーマのmRNAから、プライマー変えてVHとVLをPCR増幅し、クローンを分離した後、塩基配列解析した。その結果、VHおよびVLの3'末端部分にコードされるミノ酸配列に異常が認められた。この配列の異常は一塩基の欠落によもので、活性のあるScFvができない理由と考えられた。再度、新しクローニングしたVHとVLを用い、リンカーアミノ酸を介してScを作成し、大腸菌に発現させたが、活性のある抗体は産生されなかっこの原因として、リンカーアミノ酸配列が悪いのか、ScFv抗体が核酸高次構造を確認できないのか、今のところ不明である。
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