| 研究課題/領域番号 |
06660383
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
基礎獣医学・基礎畜産学
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| 研究機関 | 宮崎大学 |
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研究代表者 |
村上 昇 宮崎大学, 農学部, 助教授 (80150192)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1995年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 生物時計 / 概日リズム / 松果体 / メラトニン / 視交叉上核 / 神経培養 / リズム / 生体時計 / 日内リズム |
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| 研究概要 |
1.鳥類間における松果体の生体時計の有無および光同調機構の有無の比較
鳥の松果体細胞を培養し、これを還流することによって放出されるメラトニンホルモンを指標に、ハト、スズメ、ヒヨコ、ウズラの生体時計が松果体に存在するか否かを検討し以下の結果を得た。恒常暗下で細胞還流を行うと、ハト、スズメ、ヒヨコの松果体細胞はメラトニン分泌リズムを継続し、生体時計が存在する事を確認した。一方、ウズラの松果体細胞はリズムの消失を起こした。このことは、ウズラの松果体には時計の発信体が存在しないか、存在しても非常に微弱であることを示唆している。
2.松果体細胞の光同調機構
鳥類の松果体に光を照射するとメラトニンの急激な分泌低下が起こる。この機序としてプロテインキナーゼC(PKC)の関与の可能性について検討した。TPA(フォルボルエステルの一種)を細胞培養に添加すると、添加量依存的に光を同様にメラトニン分泌低下を誘起した。PKCの阻害薬スタウロスポリンを光照射と同時に添加するとメラトニン低下を阻止した。以上のことから松果体細胞の光によるメラトニン分泌低下にはプロテインキナーゼCの関与が考えられる。
3.ラット視交叉上核の時計関連蛋白質について
ラットの視交叉上核の神経細胞の明暗条件化で3時間間隔で調整し、3時間の培養中に合成される蛋白質を次元電気泳動法、およびイメージキャスナ-で検索した。その結果、64KDaの蛋白質が時刻依存的に合成されること、また他の神経細胞では合成されないことが判明した。
4.ヒヨコ松果体細胞の時計とcAMPの関係
鳥類松果体細胞にはのメラトニンリズムへのcAMPの関与を検討した。プロテインキナーゼA特異的阻害薬H8は量依存的にメラトニン分泌を抑制した。一方プロテインキナーゼCの阻害薬カルフォスチンでは抑制効果は見られなかった。以上の結果は、鳥類松果体細胞の生物時計は細胞内に於いて、自らアデニレートサイクラーゼを活性化し、cAMPを合成すること。また、このcAMPはプロテインキナーゼAを介してメラトニンの分泌を誘起することを示唆している。
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