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超音波断層像および羊水中浮遊細胞DNAのPCR法による牛胎子の性判別

研究課題

研究課題/領域番号 06660404
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 応用獣医学
研究機関鹿児島大学

研究代表者

上村 俊一  鹿児島大学, 農学部, 助教授 (90233949)

研究分担者 浜名 克己 (浜名 克巳)  鹿児島大学, 農学部, 教授 (30011977)
研究期間 (年度) 1994 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1995年度)
配分額 *注記
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1995年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1994年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワード性判別 / ウシ / 生殖結節 / 超音波診断 / PCR法
研究概要

国際化に対応する畜産経営を推進するためには、生まれてくる子牛の性を胎子期のできるだけ早期に診断し、合理的な繁殖管理計画を確立することにより生産コストの低減を図る必要がある。これまで、初期胚の人為的な操作による性判別が試みられているが、いずれも複雑で、凍結融解後の胚の損傷や早期胚死滅がみられ、完全な実用化の段階にはいたっていない。一方、Y染色体特異的DNAは動物において精巣決定遺伝子であることが報告され、このため体細胞の一部を採取し、PCR法によりDNAを増幅し、性判別が行われるようになった。
本研究では、家畜における超音波断層装置を利用した新しい診断技術として、妊娠早期における牛胎子の性判別を実施し、実用的な性判別診断のガイドラインを作成することを目的とした。また、超音波ガイドにより穿刺採取した牛羊水中の浮遊細胞のDNAをPCR法により増幅し、Y染色体特異的DNA配列に基づくプローブを利用して性判別の確定診断を行った。
その結果、超音波断層法による性判別については、妊娠45日以降では生殖結節が確認でき、90/117例について性判別が可能であった。性判別では生殖結節の位置が臍帯の後方にあれば雄で、後肢の後方で尾の前方にあれば雌と判定された。判定の正確率は雄胎子で93.6%(43/46)、雌胎子で90.9%(40/44)であり、また、臍から生殖結節までの距離は妊娠56日目から雌雄に差が見られ、それ以降の超音波診断で性判別が可能になることが明らかとなった。
PCR法による牛羊水中DNA解析では、35例について穿刺を行い、33例から羊水の採取が可能であった。内訳は29例が羊水、4例が尿膜水であった。採取された羊水中および尿膜水中の浮遊細胞をPCR法により増幅し、Y染色体特有プローブにより性判別を行った。その結果、31例でDNAバンドが確認され、性判別の正解は93.5%(29/31)で、2例が不正解、また2例はDNAバンドが確認されず、判定不能であった。羊水の穿刺採取後、1週間以内に5頭で流産が見られた。

報告書

(3件)
  • 1995 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (24件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (24件)

  • [文献書誌] Kamimura S.: "Determining sex of the bovine fetus with Y-chromosome specific DNA amplified by PCR in fetal fluid aspirated by transvaginal-transuterine ultrasound-guided amniocentesis." Proc. 18th World Buiatrics Congress.1. 265-268 (1994)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 西山公二、他: "超音波ガイド法による卵子および羊水の経膣穿刺" 鹿児島県獣医師会会報. 13. 23-26 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 上村俊一、他: "黒毛和種受胚牛の超音波断層装置による卵巣所見と血液中progesterone濃度" 鹿大農学術報告. 44. 29-34 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 多久津昌治、他: "PCR法によるウシの初期胚と胎子の性判定" 西日本畜産学会報. 37. 43-47 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S.: "Turrover of ovulatory and non-ovulatory dominant follicles in postpartum Japanese black cows." J. Reprod. Dev.40. 171-176 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S.: "Ultrasonic diagnosis of bovine fetal sex by the relative location of the genital tubercle in early pregnancy." J. Reprod. Dev.40. 343-347 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura,S.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guided amniocentesis in cows" Aust. Socie. Reprod. Biol.27. 70-70 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 上村俊一、他: "分娩後の牛の卵胞形成に及ぼすcarry-over effectの影響" 鹿大農学術報告. 45. 59-63 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 上村俊一: "牛の臨床繁殖における超音波診断法" 臨床獣医. 13. 20-28 (1995)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura,S.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guide amniocentesis in cows" Theriogenology. (Submitted). (1996)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Nishiyama K., Sameshima H., Hamana K.: "Determining sex of the bovine fetus with Y-chromosome specific DNA amplified by PCR in fetal aspirated by transvaginal-transuterine ultrasoud-guided amniocentesis." Proc.18th World Buiatrics Congress. 1. 265-268 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishiyama K., Kamimura S., Nagano M., Goto K., Hamana K.: "Ultrasound-guided transvaginal aspiration of follicular oocyte and amniotic fluid." J.Kagoshima Vet.Med.Assoc.13. 23-26 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Ono M., Sameshima H., Enomoto S., Hamana K.: "Ultrasonic findings in the ovaries and associated concentrations of plasma progesterone in Japanese black cows transferred with frozen-thawed embryos." Bull.Fac.Agri.Kagoshima Univ.44. 29-34 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ookutsu S., Maeda Y., Goto K., Kamimura S., Yanagida K., Nakanishi K., Kuboto C., Kajisa O., Kawabata K., Yokoyama K., Inohae S.: "Sexing of bovine embryos and fetuses by the polymerase chain reaction technique." Western Japan.J.Animal Science.37. 43-37 (1994)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Sameshima H., Enomoto S., Hamana K.: "Turnover of ovulatory and non-ovulatory dominant follicles in postpartum Japanese black cows." J.Reprod.Dev.40. 171-176 (1994)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Kondoh S., Enomoto S., Sameshima H., Goto K., Hamana K.: "Ultrasonic diagnosis of bovine fetal sex by the relative location of the genital tubercle in early pregnancy." J.Reprod.Dev.40. 343-347 (1994)

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      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Mizushima Y., Nagano M., Hamana K.: "Previous pregnancy carry-over effects on the folliculogenesis in the postpartum cows ovaries." Bull.Fac.Agri.Kagoshima Univ.45. 59-63 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Ookutsu S., Goto K., Hamana K.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guided amniocentesis in cows." Proc.27th Australian Society for Reproductive Biology. 71. (1995)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S.: "Ultrasonography in clinical reproduction in cows." Clinical Veterinary Practice.13 (10). 20-28 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura S., Nishiyama N., Ookutsu S., Goto K., Hamana K.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guide amniocentesis in cows." Theriogenology. (Submitted). (1996)

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    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kamimura,S.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guided amniocentesis in cows" Aust.Socie.Reprod.Biol.27. 70-70 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] 上村俊一、他: "分娩後の牛の卵胞形成に及ぼすcarry-over effectの影響" 鹿大農学術報告. 45. 59-63 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] 上村俊一: "牛の臨床繁殖における超音波診断法" 臨床獣医. 13. 20-28 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Kamimura,S.: "Ultrasonic Diagnosis of Bovine Fetal Sex by the Relative Location of the Genital Tubercle in Early Pregnancy" J.Reprod.Dev.40. 343-347 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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