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トランスゴルジ網様体におけるソーティング機構の分子解剖

研究課題

研究課題/領域番号 06670006
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 解剖学一般(含組織学・発生学)
研究機関群馬大学

研究代表者

田中 滋康  群馬大学, 生体調節研究所, 講師 (90146233)

研究期間 (年度) 1994 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1994年度)
キーワード下垂体前葉細胞 / Rab6 / Rab3 / γ-アダプチン / 三量体G蛋白質 / ゴルジ装置 / 免疫細胞化学
研究概要

トランスゴルジ網様体(TGN)は,ゴルジ装置の最もトランス側に位置するコンパートメントであり,分泌の中枢と考えられている。本研究では,調節性分泌機構,特に分泌顆粒形成を含むソーティングの素過程に関与すると予想される分子が内分泌細胞のいずれのオルガネラに局在し,ホルモンの分泌動態と関連してどのように分布するかを免疫細胞化学的に明らかにするために行われた.低分子量G蛋白質(Rab6,Rab3)や三量体G蛋白質は,細胞内の物質輸送の鍵となる分子であるので,今回これらの分子に対する抗体を作製した.1.Rab3,Rab6,γ-アダプチン,TGN38のアミノ酸配列から,親水性でかつアミノ酸配列の相同性の低い領域を予測した.2.その部分のペプチドを合成し,ウサギに免疫し特異的な抗ペプチド抗体を得た.3.いずれの抗体もラット下垂体前葉のホルモン細胞を特異的に染めた.4.Rab6,γ-アダプチンはゴルジ領域を特異的に染めた.5.下垂体ホルモン産生細胞のモデル細胞であっるACTH産生腫瘍由来のAtT-20細胞や成長ホルモン産生腫瘍由来のGH4C1細胞でも同様な結果を得た.6.三量体G蛋白質のうちGsα,Gi3αに対する抗体は細胞膜を強く染めた.7.Rab3Aに対する抗体はラット下垂体のACTH細胞の分泌顆粒を,またRab3BはGH4C1細胞の分泌顆粒を強く染めた.このように同じRab蛋白質でも種類によりその局在が異なることが明らかにされた.今後,TGN38の抗体によりTGNの構造を明確に同定した上に,Rab6,Rab3や三量体Gタンパク質の抗体で二重標識を行い,それぞれの分子の局在を比較検討し,局在性の差異からTGNにおけるソーティング機構におけるそれぞれの分子の役割を考察したい。

報告書

(1件)
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (5件)

  • [文献書誌] 田中滋康: "免疫細胞化学のためのペプチド抗体作製法" 組織細胞化学1994. 104-110 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Yasuda,H.: "Activin A:negative regulator of amylase secretion and cell proliferation in rat pancreatic acinar AR42J cells." Amer.J.Physiol.267. G220-G226 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Mizutani,F.: "A morphometric analysis of the subcellular distribution of LHβ and FSHβ in secretory granules in the pituitary gonadotrohs of frog (Rana japonica)." Cell Tissue Res.277. 417-426 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Kikuyama,S.: "Sodefrin:a female-attracting peptide pheromone in newt clocal glands." Science. 267. 1643-1645 (1995)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Shibata,H.: "Dissection of GLUT4 recycling pathway into exocytosis and endocytosis in rat adipocytes:evidence that GTP-binding protein are involved in both processes." J.Biol.Chem.(in press).

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1996-04-08   更新日: 2016-04-21  

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