ヒト同種体液混合斑痕の血液型分離判別法の開発

• 研究課題/領域番号: 06670448
• 研究種目: 一般研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 法医学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 匂坂 馨 (勾坂 馨) 東北大学, 医学部, 教授 (70006740)
• 研究分担者: 那谷 雅之 東北大学, 医学部, 助手 (70241627)
• 研究期間 (年度): 1994 – 1995
• 研究課題ステータス: 完了 (1995年度)
• 配分額: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円); 1995年度: 400千円 (直接経費: 400千円); 1994年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: Mixed stain / ABH blood group / ELISA / 混合斑痕 / ABH式血液型 / Mixedstain, / ABH blood group,

研究概要

同種混合斑痕の血液型分離型判定を目的として種々の検討を行った.まず,分泌型A型とB型唾液の混合液を作製し,その型活性をELISAによって定量した.次に,モノクローナル抗Aまたは抗B (Biotest製)の100μlを加えて固相化した多数のマイクロタイタ-孔を用意した.孔をブロック後,上記混合液100μlを抗Aまたは抗Bを固相化したマイクロタイタ-孔に入れ,1時間反応させた.その後,検体を別のマイクロタイタ-孔に移して反応させ,この操作を10回繰返したのち,検体のABH式型活性をELISAで定量した.これは,抗Aまたは抗Bを固相化した孔により対応する型抗原を吸収・減量を意図するものであったが,検査結果には吸収効果は全く認められなかった.同様な検討をマイクロタイタ-孔に替えてニトロセルロース膜を使って行った.すなわち,モノクローナル抗Aまたは抗Bを固相化したニトロセルロース膜を唾液混合液に加え,A型またはB型抗原の吸収・減量を試みたがここでも効果は認められなかった.これは,固相担体の抗体捕捉量が少ないためと考えられ,捕捉量の大きな担体を選択・考案する必要がある.
異種混合斑痕の分離型判定のために,涙や羊水に特異的なポリクローナル抗体の作製を試みた.抗涙抗体を用いたサンドイッチELISAによって,涙と鼻汁を除いた各種体液のABH式血液型を分離型判定が可能であった.また抗羊水を用いたサンドイッチELISAによって,血液・尿・膣液と混合した羊水のABH式血液型を分離型判定することに成功し,これは嬰児遺棄事件などでの分娩現場の推定に役立つものと考えられる.

研究成果

• [文献書誌] 長江美紀子,青木康博,何平,那谷雅之,匂坂馨: "ヒト羊水に特異的なマウス単クローン抗体の作成とそれによる羊水のABH式血液型判定" 法医学の実際と研究. 37. 81-86 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nagae, H., Nata, M., Aoki, Y. and Sagisaka, K.: "Preparatin of tear specific antibody and its application to foreusic pratice" Act. Crim. Jpn. 61. 181-186 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nagae, H., Aoki, Y., Nata, M., Hashiyada, M. and Sagisaka, K.: "Monoclonal antibody against au amuiotic protein carrying ABH blood group epitopes and its foreusic application" Tohoku J. Exp. Med.177 (in press). (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nagae, M., Nata, M., Aoki, Y.and Sagisaka, K.: "Preparation of tear specicic antibody and its application to forensic practice." Act. Crim. Jpn.61. 181-186 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nagae, M., Aoki, Y., NaTA,M., Hashiyada, M.and Sagisaka, K.: "Monoclonal antibody against an amniotic protein carrying ABH blood group epitopes and its forensic application." Tohoku J.Exp. Med.177 (4)(IN PRESS). (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 長江美紀子・勾坂馨 他: "ヒト羊水に特異的なマウス単クローン抗体の作成とそれによる羊水のABH式血液型判定" 法医学の実際の研究. 37. 81-86 (1994)
• [文献書誌] Nagae, M. SAgisaka, K. et al.: "Preparation of tearspecrfic autibody and its application to forensic practice" Act. Crim. Jpn.61. 181-186 (1995)
• [文献書誌] Nagae, M. SAgisaka, K. et al.: "Monoclonal autibody against au amniotic protein carring ABH bloodgroup epitopes and its forensic application" Tohoku J. Exp. Med.177(印刷中). (1995)
• [文献書誌] 長江美紀子,勾坂馨: "ヒト羊水に特異的なマウス車クローン抗体の作成とそれによる羊水のABH式血液型判定" 法医学の実際と研究. 37. 81-86 (1994)
• [文献書誌] 伊谷雅之,勾坂馨: "PCR法によるMH式血液型判定法の法医学的応用" DNA多型. 2. 135-138 (1994)
• [文献書誌] 伊谷雅之,勾坂馨: "血痕からのDNA抽出とPCRによる多型検出" 法医学の実際と研究. 37. 49-53 (1994)