| 研究課題/領域番号 |
06670549
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
消化器内科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
永野 公一 大阪大学, 医学部, 助手 (60237542)
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| 研究分担者 |
増田 栄治 大阪大学, 医学部附属病院, 医員
竹井 謙之 大阪大学, 医学部附属病院, 医員
辻 晋吾 大阪大学, 医学部附属病院, 医員
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1995年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | アンチセンス・オリゴヌクレオチド / 消化器癌 / c-myc / bcl-2 / ki-ras / Ki-ras / アンチセンス・オリゴタクレオチド / k-ras |
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| 研究概要 |
本研究では、細胞内の特定の遺伝子発現を抑制するアンチセンス・オリゴヌクレオチドを用いて癌遺伝子の発現を特異的に抑制することにより、消化器癌の治療法が可能かどうか基礎的に検討を行った。培養実験で用いた胃癌細胞株はMKN45細胞で、c-myc、bcl-2遺伝子の発現過剰が確認されている。これら癌遺伝子に対するアンチセンス・オリゴヌクレオチドをフォスフォーロチオエ-ト体で合成した。また、K-ras遺伝子に点突然変異を有する大腸癌細胞株DLD-1を用いてK-rasアンチセンス・オリゴヌクレオチドの抗腫瘍効果の有無を合わせて検討した。さらにヌードマウスに移植した腫瘍に対してアンチセンスオリゴヌクレオチドを腫瘍内に投与し、腫瘍発育抑制効果の有無を確認した。その結果、c-mycおよびbcl-2アンチセンス・オリゴヌクレオチドは1-10μMの濃度でMKN45細胞の増殖を用量依存的に抑制した。一方対照としたセンス・オリゴヌクレオチドはMKN45細胞の増殖を抑制しなかった。またRT-PCR法、フローサイトメトリーで検討した結果、c-mycアンチセンス・オリゴヌクレオチドはmRNAレベル、蛋白レベルの両方でc-myc遺伝子の発現を特異的に抑制することが明らかになった。またアンチセンス・オリゴヌクレオチドの抗腫瘍効果の一部にアポトーシスの誘導が関与することも確認された。さらにK-rasアンチセンス・オリゴヌクレオチドはDLD-1細胞の増殖を最大60%抑制した。アンチセンスオリゴヌクレオチドの抗腫瘍効果は、ヌードマウスに移植した腫瘍に対しても認められ、c-mycアンチセンス・オリゴヌクレオチド、K-rasアンチセンス・オリゴヌクレオチドはMKN45腫瘍、DLD-1腫瘍の発育をそれぞれ40%、60%抑制した。本法は、今後新たな治療原理に基づく消化器癌治療法としてその可能性をさらに追求する価値があると考えられる。
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