| 研究課題/領域番号 |
06671130
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
中尾 彰秀 東京大学, 医学部(病), 助手 (10159056)
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| 研究分担者 |
小原 まみ子 東京大学, 医学部(病), 助手 (60261963)
奥田 俊洋 東京大学, 医学部(病), 助手
谷口 茂夫 東京大学, 医学部(病), 助手 (50188380)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1995年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1994年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | PAF receptor / EP3 receptor / RT-PCR / northern blott / PAF受容体 / モノクロナール抗体 / EP_3受容体 / TX受容体 / PGE_2 / PAF / 受容体 |
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| 研究概要 |
腎ネフロンには種々のホルモンが作用し腎の濾過機能、水電解質代謝の調節を行っている。また同時に腎はprostaglandin E2をはじめとするPGsを産生するとともに機能的な支配をうけていることもよくしられている。そこで我々はネフロンに沿ったhormoneとPGsの作用とその生理的役割について細胞生物学的及び分子生物学的なレベルにまで掘り下げ解明するため、まずそのhorumone,PGsの受容体の分布を明らかにし、さらにその定量化を試みた。まずmutationを導入したRT primerを用いたRT-PCR法によってPGE2受容体のisoformであるEP3の分布とその定量化を行った。この方法の特長はmutant RT primerを使用することによって、細胞一個あたりの量が決まっているgenomic DNAとmRNAの量の比較が可能となり、genomic DNAを基準としたmRNAの定量化ができることである。その結果、EP3受容体mRNAは主として遠位尿細管に分布し、近位尿細管には存在しないことが明かとなった。ただし幼若なラットでは近位尿細管にも存在し、週齢によってその分布が異なることが明らかになった。次いで培養メサンギウム細胞を用いて、PGsと同様eicosanoidの一種でメサンギウム細胞の細胞内カルシウムの上昇をもたらし、DNA合成を促進する。PAFの受容体mRNAの検討を行った。その結果、PAFは1時間程度の短時間では細胞内カルシウムの増加を介してPGE2の産生を刺激し、このPGE2がcAMP増加を介してPAF受容体mRNAをdown regulationをすることが明らかとなった。一方メサンギウム細胞においてPAF受容体の発現を増強する刺激について検討を加え、そのような刺激の存在を確認したが、詳細な検討はまだ終了していない。
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