ヒト食道癌におけるRT-PCR法を用いた制癌剤耐性関連遺伝子の発現量測定の意義

• 研究課題/領域番号: 06671305
• 研究種目: 一般研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 慶応義塾大学
• 研究代表者: 小澤 壯治 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10169287)
• 研究分担者: 池田 佳史 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20222870) ; 佐藤 道夫 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50215852)
• 研究期間 (年度): 1994
• 研究課題ステータス: 完了 (1994年度)
• 配分額: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 1994年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 食道癌 / RT-PCR法 / 制癌剤耐性

研究概要

1.材料と方法:
(1)食道癌をはじめとする6種類の扁平上皮癌細胞株、および食道癌の内視鏡生検材料を用いた。
(2)GST-π、mdr-1、MT-IIAに対するPCRプライマーを作製した。
(3)制癌剤に対する感受性試験はMTTアッセイを用いた。
(4)遺伝子発現量の定量はNorthern blot法とRT-PCR法を用いた。
2.結果:
(1)癌細胞と臨床組織より得られたtotal RNAに対して、RT-PCR法を行い、GST-π、mdr-1、MT-IIAに対応する435bp,290bp,179bpの大きさのPCR産物が得られた。これらは、プライマーの設計時に予想した大きさであった。
(2)PCR産物と至適PCRサイクル数をそれぞれのプライマーについて求めた。
(3)癌細胞株のCDDP耐性は、GST-π、MT-IIAのmRNAレベルと、ADM耐性はMT-IIAのmRNAレベルと正の相関を示した。
(4)ヒト食道癌組織中のmdr-1mRNAレベルは正常粘膜に比べて高く、逆にGST-π、MT-IIAのmRNAレベルは低い傾向にあった。
(5)食道癌組織中のMT-IIAのmRNAレベルは、CDDPによる増殖抑制率と負に相関する傾向にあった。