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ヒト精子活性化蛋白遺伝子のクローニングと精子活性蛋白の大量調製

研究課題

研究課題/領域番号 06671680
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 産婦人科学
研究機関独協医科大学

研究代表者

大竹 英樹  獨協医科大学, 医学部, 助教授 (00049214)

研究期間 (年度) 1994 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1995年度)
配分額 *注記
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1995年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1994年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード精子活性化蛋白 / 精子活性化蛋白遺伝子 / ヒト卵巣 / ヒト精子 / 精子運動能 / 精子活性化 / 遺伝子クローニング / 精子活性化蛋白質 / 精子活性化蛋白質遺伝子 / ニシン
研究概要

海産魚のニシンで見いだされた「成熟未受精卵より分泌された蛋白による精子活性化機構が、ヒトの受精においても機能していることが示唆されている。本研究では、ニシン精子活性化蛋白遺伝子に由来するcDNAをプローブとしてヒト卵巣cDNAライブラリーをスクリーニングし、精子活性化蛋白の遺伝子工学的方法による大量調製法の確立と、卵巣における遺伝子発現細胞の同定を目的としている。ヒト卵巣cDNAライブラリーのスクリーニングの結果、ニシンのプローブとハイブリダイズするcDNAクローンを8クローン得ることができた。これらのクローンのインサートDNAの塩基配列の一部を決定し、ホモロジー検索を行ったところ、それらクローンの一つはフランスの研究者らによりヒトのリンパ芽球cDNAライブラリーによりクローニングされたcDNA断片群(それぞれ約300塩基対)の一つと一致していた。しかし、そのcDNAがどの様な蛋白をコードするかは全く分かっていない。残りのクローンのインサートDNAは、全て未だ報告されていない遺伝子に由来するcDNAであった。これらcDNAのクローンは卵巣のライブラリーよりスクリーニングされたが、本当に卵巣だけで発現しているかを調べるため、それぞれのクローンについて、各器官および組織より調整したRNA標品を用いたノーザンブロット法を行って検討している(2クローンのみ検討済み)。現在、卵巣だけで発現していると考えられるクローンを一つ得ている。このcDNAがどの様な蛋白をコードしているかを決定するため、完全鎖長のcDNAクローンの分離を試みているが未だ成功していない。このクローンが分離できたら、インサートDNAをヴァキュロウイルス発現ヴェクターに組み込み、昆虫の鱗翅類の卵巣細胞由来の培養細胞由来の培養細胞であるsf9細胞に導入して、当該遺伝子のコードする蛋白を大量に調製し、その生理活性を調べる予定である。

報告書

(3件)
  • 1995 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (13件)

  • [文献書誌] Oda,S,Igarashi,Y,Ohtake,H,Sakai,K,Shimizu,N.&Morisawa,M.: "Spemu activeting piotein from Unfertilzod eggs of the Pacific Perring ,Clupeapalasii" Develop.Growth Differ.37. 257-261 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tadokoro,N,Koibuchi,N.Ohtake,H,Kowatsu,T,Kato,Y,Yamaoka,S.&Matsugahs,T.: "Expression of prolactin gene in hcman deciduo during pregnancy studied by in situ hybidization histochemisty." Findocrire J.42. 537-543 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Koibuchi,N,Komo,R.,Matsuzaki,S.,Ohtake,H,Niwa,A.&Yamaoka.S.: "Eocalization of D,amirco acid oxidase m RNA in the mousl kidnoy and the effact of tostostsone tro atiment" Histochem Cell Biol. 104. 349-355 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tadokoro,N.,Koibuchi,N.,Ohtake,H.,Kawatsu,T,Ohkawa,H,Yamaoka,S.&Kumasaka,T.: "Localization of prolaction and ito receptor,massenger RNA in the human decidua" Experientia. 51. 1216-1219 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oda, S., Igarashi, Y., Ohtake, H., Sakai, K., Shimizu, N.& Morisawa, M: "Sperm-activating proteins from unfertilized eggs of the Pacific herring, Clupea palasii" Development Growth and Differentiation. 37. 257-261 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tadakor, N., Koibuchi, N., Ohtake, H., Kawatsu, T., Kato, Y., Yamaoka, S.& Matsuzaki, T.: "Expression of prolactin gene in human decidua during pregnancy studied by in situ hybridization histochemistry" Endocrine J.42. 537-543 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Koibuchi, N., Nonno, R., Matsuzaki, T., Ohtake, H., , Niwa, A.Yamaoka, S.: "Localization of D-amino acid oxidase mRNA in the mouse kidney and the effect of testosterone treatment" Histocem.Cell Biol.104. 349-355 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tadokoro, N., Koibuchi, N., Ohtake, H., Kawatsu, T., Ohkawa, H., Yamaoka, S.& Kumasaka, T.: "Localization of prolactin and its receptor messenger RNA in the human decidua" Experientia. 51. 1216-1219 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Oda, S., Igavashi, Y., Ohtake, H., Sahai, K., Shimizu, N., & Morisawa, M.: "Sperm activating proteins from unfertilized eggs of the Pacific horring, Clupea pallasii" Develop. Growth Differ. 37. 257-261 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Tadokoro, N., Koibuchi, N., Ohtake, H., Kawati, T., Kato, Y., Yamaoka, S., & Kumasaka, T.: "Expression of Prolactin Gene in Human desidua during Prognancy Studied by in Oitu Hybridigation Histochemistry." Endocrine J.42. 537-543 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Koibushi, N., Konno, R., Matsuzaki, S., Ohtake, H., Niwa, A., Yamashe, S.: "Localization of D-amino acid Oxidase mRNA in the mouse kidney and the effect of testosterone treatment" Aistochem Cell Biol. 104. 349-355 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Tadokoro, N., Koibuchi, N., Ohtake, H., Kawatsu, T., Ohkawa, H., Kato, Y., Yamashe S., & Kumasaka, T.: "Localization of prolactin and its receptor messenger RNA in the human cleciclua" Experientia. 51. 1216-1219 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] S.Oda,Y.Igarashi,K.Sakai,M.Morisawa,H.Ohtake & N.Shimizu: "Sperm activating proteins from unfertiliged egg of the Pacific herring, Clupea pallasi." Development,Growth & Differentiation. 37(in press). (1995)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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