| 研究課題/領域番号 |
06672208
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 北陸大学 |
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研究代表者 |
山本 郁男 北陸大学, 薬学部, 教授 (50069746)
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| 研究分担者 |
宇佐見 則行 北陸大学, 薬学部, 助手 (60257483)
松永 民秀 北陸大学, 薬学部, 講師 (40209581)
渡辺 和人 北陸大学, 薬学部, 助教授 (30113038)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1995年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1994年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
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| キーワード | P450 / アルデヒド / アルコール / オキシゲナーゼ / カンナビノイド / クローニング / MALDO / MALCO / アルコーナ |
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| 研究概要 |
新規カルボニル基代謝酵素Microsomal Alcohole Oxygenase (MALCO)及びMicrosomal Aldehyde Oxygenase (MALDO)の構造と機能解析に関する研究に関して、以下の点を解明した。
1)マウス肝において、11-oxo-Δ^8-tetrahydrocannabinol (11-oxo-Δ^8-THC)のMALDO活性は、加齢により増加、その変動はミクロソーム(Ms)中のP450MUT-2 (Cyp2c-29)含量と良く一致していた。
2)9-AAのMALDO活性を指標に、マウス、モルモット及びニホンザルの各肝Msより、いずれも2B subfamilyに属することが推定されるP450MDX-A、P-45OGPF-A及びP450JM-Cをそれぞれ精製した。
3)マウス肝のMALDOは、anisaldedyde、piperonal、α-n-amylcinnamaldehyde、vanillin及びtolualdehyde等も基質としたことから、幅広くアルデヒドの代謝に関与することが示唆された。
4)7-OH-Δ^8-THCのMALCO活性を指標に、マウス、モルモット及びニホンザルの各肝Msより、いずれもCYP3Aの分子種であることが推定されるP450MDX-B、P450GPF-B及びP450JM-Eをそれぞれ精製した。
5)P450MDX-Bに相当するcDNAをクローニングし、その一次構造を明らかにした。その配列から、P450MDX-BはCyp3a-11であることが示唆された。また、マウスCyp2c-29に、系統によるalleic variantの存在が示唆された。Cyp2c-29とP450MDX-BのcDNAを発現ベクターpCMV4に挿入、現在COS7細胞での発現について検討中である。
これらの結果より、11-oxo-Δ^8-THCのMALCO活性はCYP2Cが、9-AAのMALCO活性はCYP2Bが主要な酵素であり、基質によって異なる分子種により触媒されることが明かとなった。また、MALCO活性の主要酵素はCYP3Aであり、その一次構造はMALDOとはかなり異なることが推定された。
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