| 研究課題/領域番号 |
06672225
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 国立予防衛生研究所 |
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研究代表者 |
北川 隆之 国立予防衛生研究所, 細胞化学部, 室長 (80092188)
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| 研究分担者 |
山河 芳夫 国立予防衛生研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (50100102)
KITAGAWA Takayuki NATL INST HEALTH,of JAPAN,Laboratory Chief (80092188)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1995年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
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| キーワード | GLUT1タンパク質 / N-結合型糖鎖修飾 / ヒトがん病態 / 癌抑制遺伝子 / カベオリン / 細胞膜タンパク質 / グルコース輸送 / ヒトがん細胞 |
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| 研究概要 |
我々は、動物細胞のグルコース輸送が細胞膜に依存する約55kDの糖タンパク質であるグルコース輸送タンパク質(GLUT1)の発現量ならびに、その糖鎖修飾を介して調節されていることをすでに明らかにしている。本研究ではヒトがん細胞におけるGLUT1発現と機能調節について検討した。
ヒト由来がん細胞株のGLUT1の発現を抗GLUT1抗体を用いたイムノブロット法で調べたところ、子宮がん細胞(HeLa)および肺がん細胞(A549)において、糖鎖修飾による高分子量化が認められた。この糖鎖変化に伴い、GLUT1のグルコース親和性も顕著に増加していた。また融合細胞株を用いた解析より、HeLa細胞におけるGLUT1の糖鎖修飾と機能変化が、正常細胞由来の癌抑制遺伝子機能の欠失に依存した造腫瘍性と密接な関連を示すことを明らかにした。各種レクチンの全膜タンパク質への結合性には大きな変化が認められず、糖鎖修飾はGLUT1に高い特異性を示した。更に、糖鎖分解酵素や各種レクチン、および糖鎖合成阻害剤を用いた解析の結果、がん化に伴うGLUT1の糖鎖修飾は、主としてN-結合型糖鎖の鎖長の進展によることが判明した。
ヒトがん病態における癌抑制遺伝子機能を更に解析するため、HeLa融合細胞系における細胞膜タンパク質変化を検索した結果、細胞膜に存在するカベオラ構造の主要タンパク質であるカベオリンの発現が、腫瘍性細胞では顕著に低下していることを見いだした。そこで、ヒトカベオリンのcDNAをPCR法で分離し腫瘍性HeLa細胞に導入し、カベオリンの高発現株を得た。カベオリン高発現株の性状ならびにヒトがん病態との関連を更に検討中である。
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