| 研究概要 |
1.確定妊娠マウスを自然分娩させ,出生1日目のマウス新生仔に1.0Gyのγ線を照射し、小脳外顆粒層の細胞にアポトーシスを誘発させた場合,照射後の小脳における蛋白合成について検索した.γ線照射後より経時的にマウス小脳を摘出し,^<35>S-メチオニン添加の緩衝液中(37℃)で新生タンパク質をpulseラベルした後,放射ラベルされた小脳のタンパク質を二次元電気泳動し,アポトーシスに伴って出現する可能性のあるkillerタンパク質の発現を検索した.γ線照射群と対照群との間には,ラベルされた新生タンパク質の分布には変化が無く,いわゆるkillerタンパク質の誘導は見られなかった.
2.アポトーシスにおけるシグナルの伝達に,Gタンパク質が関与している可能性を明らかにする目的で,出生1日目のマウス新生仔にリチウム(10μmol/g)を皮下投与し,2時間後に0.5Gyのγ線を照射した.形態的なアポトーシスの指標とされる小脳外顆粒層の核濃縮細胞の出現頻度の上昇は,リチウム投与群で非投与群に比べて約6時間遅延した.リチウムは,phosphoinositideの代謝回転および,それのGタンパク質へのguanine-nucleotideの結合を阻害することから,放射線誘発アポトーシスのシグナルは,cyclic-AMPまたはphosphoinositideを介して伝達されることが示唆された.
3.妊娠8日目の母マウスに0.05Gyのγ線を照射しアポトーシスを誘発させた場合,照射後4〜8時間目にheat shock proteinやc-fosなどが誘導されるが,この時期に1.0または0.5Gyの2度目のγ線照射を行い,アポトーシスを阻害するようなadaptive responseの獲得があるかどうか検索した.end pointとしての出生前日における外脳症の頻度には大きな変化は無く,adaptive responseは形成されないことが示された.
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