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大腸菌の相同組換えに関与する新しい遺伝子recHの解析

研究課題

研究課題/領域番号 06740568
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 遺伝
研究機関大阪大学

研究代表者

岩崎 博史  大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (60232659)

研究期間 (年度) 1994
研究課題ステータス 完了 (1994年度)
配分額 *注記
900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワード遺伝的相同組換え / ruvC遺伝子 / dksA遺伝子 / ホリデ-構造 / 相同組換え中間体 / ホリデ-構造解消酵素 / エンドヌクレアーゼ / 二重変異
研究概要

大腸菌のruvC遺伝子は,遺伝的相同組換えの中間体であるホリデ-構造を切断するエンドヌクレアーゼをコードしている。ところが,ruvC単独ミュータントは,さほど組換え欠損にならない。このことは,大腸菌にはruvC遺伝子産物以外による組換え中間体のプロセッシング機構が存在することを示唆している。我々は,ruvCとの二重変異で組換え欠損となる新たなTn10挿入変異株を単離し,その原因遺伝子をrecHと名付け解析した。その結果,以下の成果を得た。
recH変異を相補するプラスミドクローンを大腸菌のPstIライブラリーから得た。挿入DNAは,約4kbあり,小原らの大腸菌ラムダライブラリーとハイブリダイゼイションを行いクローンを対応させた結果,λ115とλ166であることがわかった。詳細な欠失プラスミドを作成して対応する遺伝子を求めた結果,dksA遺伝子と recH遺伝子は同一の遺伝子であることがわかった。dksA変異は,分子シャペロニンの一つをコードしているdnaKの欠損を相補するサプレッサー変異(dnaK supressor)として同定された遺伝子であるが,野性型dnaK遺伝子の機能や,サプレッションのメカニズム等詳細はわかっていない。現在,dksA遺伝子と相同組換えとの関係を解析している。

報告書

(1件)
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Shinagawa,H.,Iwasaki,H.: "Molecular mechanisms of Holliday junction processing in Escherichia coli." Advances in Biophysics. (印刷中).

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Ariyoshi,M.,et al.: "Atomic structure of the RuvC resolvase:a Holliday junction specific endonuclease from E.coli." Cell. 78. 1063-1072 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Ariyoshi,M.,et al.: "Preliminary crystallographic study of Escherichia coli RuvC protein:an endonuclease specific for Holliday junctions." J.Mol.Biol.241. 281-282 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Takahagi,M.,et al.: "Structual requirements of substrate DNA for binding to and cleavage by RuvC,a Holliday junction resolvase." J.Biol.Chem.269. 15132-15139 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Ishino,Y.,et al.: "Amino acid sequence motifs essential to 3'-5' exonuclease activity of Escherichia coli DNA polymerase II" J.Biol.Chem.269. 14655-14660 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] 岩崎博史,品川日出夫: "組換え修復の遺伝学と酵素学" 細胞工学. 13. 720-731 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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