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Arg-特異的ADP-R転移酵素のクローニングと組換え体タンパク質の発現

研究課題

研究課題/領域番号 06770085
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 医化学一般
研究機関島根医科大学

研究代表者

土屋 美加子  島根医科大学, 医学部, 助教授 (90188582)

研究期間 (年度) 1994
研究課題ステータス 完了 (1994年度)
配分額 *注記
900千円 (直接経費: 900千円)
1994年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
キーワードADP-ribose転移酵素 / アルギニン / cDNAクローニング / ADP-ribosylation
研究概要

研究目的は、1)ニワトリ骨髄由来のADP-ribose転移酵素のcDNAクローンの塩基配列を決定することにより一次構造を明らかにする。2)ADP-ribose転移酵素の組換え体タンパク質を発現して酵素活性を持つことを確認する。3)ニワトリ骨髄由来のADP-ribose転移酵素とアミノ酸配列において相同性をもつラットT細胞表面抗原RTが同様の酵素活性をもつかどうか調べる。の3点である。1)および2)については目的を達成することができ、以下のような結果を得て、J.Biol.Chem.に報告した。
ニワトリ骨髄細胞cDNAライブラリーから得た2つのクローンはウサギ骨格筋の転移酵素およびRTと一次構造においてホモロジーがあった。これらのクローンをCOS細胞で発現させて転移酵素活性があることを確認した。2つの酵素活性は塩、SH試薬に対する反応が異なっていた。
3)については、RTを大腸菌で発現させたところ、NADaseの活性は検出されたが、転移酵素活性は検出できなかった。この一連の実験中にADP-リボシルアルギニンをキャピラリー電気泳動で検出するする方法を開発しAnal.Biochem.に発表した。

報告書

(1件)
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (2件)

  • [文献書誌] Mikako Tsuchiya: "Cloning and expression of cDNA for arginine-specific ADP-ribosyltransferase from chicken bone marrow cells" J.Biol.Chem.269. 27451-27457 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Mikako Tsuchiya: "Assay of arginine-specific ADP-ribosyltransferase by capillary electrophoresis" Anal.Biochem.244. 486-489 (1995)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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