研究課題/領域番号 |
06J52783
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研究種目 |
特別研究員奨励費
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 国内 |
研究分野 |
遺伝・ゲノム動態
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研究機関 | 神戸大学 |
研究代表者 |
房 月 神戸大学, 医学系研究科, 特別研究員(DC1)
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研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2007年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2006年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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キーワード | 亜鉛代謝 / 細胞内小胞輸送 / 遺伝学 / シゲナル伝達 / タンパク質 / シグナル伝達 |
研究概要 |
カルシニューリンは酵母からヒトに至るまで高度に保存されたCa^<2+>/カルモジュリン依存性タンパク質脱リン酸化酵素であり、FK506などの免疫抑制薬の標的分子である。カルシニューリンの細胞機能は非常に多彩であるが、その詳細な作用機構はまだ不明な点が多い。カルシニューリンと機能的に関連する遺伝子を同定するために、野生株を変異原処理し、免疫抑制薬感受性変異体を分離した。さらに、カルシニューリン破壊株がCl^-感受性を示す事にヒントを得て、免疫抑制薬感受性に加えてCl^-超感受性を示す変異体を分離した。本研究ではcis4変異体に着目し、機能解析を行っている。 今年度の研究に、以下の結果を得ていた。 ●Δcis4において、亜鉛トランスポーターをコードする出芽酵母遺伝子Msc2とZrg17を共発現すると、Δcis4の表現型を回復した。pull down assayによりCis4とZrg17は直接結合した。 ●Δcis4は細胞壁の脆弱性が認められる。この細胞壁の脆弱性は亜鉛を培地に加えることにより回復した。 ●Δcis4は酸性ホスファターゼの分泌と貯蔵が抑制されていた。特に酸性ホスファターゼの分泌が抑制されていた。また、Δcis4において、GFP-Syb1の局在は異常が認められる。他の細胞内小胞輸送に異常のある変異体株であるypt3-i5、ryh1-i6、gdi1-i11、apm1-1とは、遺伝学的関係が認められた。 ●亜鉛を培地に加えることにより、ypt3-i5とapm1-1の感受性と細胞壁合成不全を回復したが、ryh1-i6とgdi1-i11は少ししか回復しなかった。 ●これまでの結果から、Cis4は、cis-Golgiにおいて、Zrg17と複合体を形成し、亜鉛トランスポーターとして機能する。Cis4はゴルジ体内の亜鉛濃度を調節することで、ゴルジ体からの細胞内輸送に関与していることが明らかになった。
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