中国における女性喉頭癌発生要因に関する臨床疫学的、分子生物学的調査研究

研究課題

研究課題/領域番号	07042009
研究種目	国際学術研究
配分区分	補助金
応募区分	がん調査
研究機関	鹿児島大学
研究代表者	大山勝鹿児島大学, 医学部, 教授 (70024677)
研究分担者	賈心善中国医科大学, 教授王鉄中国医科大学, 副教授潘子民中国医科大学, 教授費声重中国医科大学, 教授上野員義鹿児島大学, 医学部, 助教授 (00253873) 古田茂鹿児島大学, 医学部, 助教授 (80128454) 栄鶴義人鹿児島大学, 医学部, 教授 (00041351) 秋葉澄伯鹿児島大学, 医学部, 教授 (50145554) 秋山伸一鹿児島大学, 医学部, 教授 (60117413) 吉田浩己鹿児島大学, 医学部, 教授 (90036476) 園田俊郎鹿児島大学, 医学部, 教授 (40036463) 佐藤栄一鹿児島大学, 医学部, 教授 (60004579) PAN Zi Min China Medical University, Professor FEI Sheng Zhong China Medical University, Professor WANG Tie China Medical University, Associate Professor JIA Xin Shan China Medical University, Professor 費声重中国医科大学, 教授任重中国医科大学, 教授
研究期間 (年度)	1995 – 1996
研究課題ステータス	完了 (1996年度)
配分額 *注記	4,500千円 (直接経費: 4,500千円) 1996年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円) 1995年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
キーワード	中国瀋陽 / 女性喉頭癌 / HPV型 / 喫煙 / P53 / 頸部リンパ節転移 / T抗原 / 乳腺型アポムチン関連抗原 / 中国潘陽 / 声門上部癌 / レクチン組織化学 / EBV / HPV / p53
研究概要	中国瀋陽地区で女性に多発する喉頭癌症例について、臨床疫学的、分子生物学的検討を行った。 1.1990年〜1995年の6年間に中国医科大学を受診した喉頭癌症例は、男性181例(36歳〜80歳、平均年齢58.9歳)、女性84例(40歳〜77歳、平均年齢58.7歳)、総症例265例であった。これらの症例の男女比は2.2:1と女性の占める割合が著しく高かった。 2.これらの喉頭癌症例での喫煙者の割合は、男性では181例中170例、93.9%、女性で84例中72例、85.7%であり、全症例の85%以上を占めていた。一方、瀋陽地区の20歳以上の健常女性の喫煙率17.9%に比して女性例での喫煙者が異常に高かった。 3.腫瘍の発生部位別頻度では、男性の場合、声門上部癌が181例中97例、53.5%と最も多く、次いで声門部癌77例、42.5%であるのに対して、女性では声門上部癌が84例中73例、86.4%と異常に多かった。また、声門上部癌では85.5%、声門部癌では62.5%に喫煙歴が認められた。Blinkman指数では男女共に大多数が200以上でかつ400前後にピークを有していた。 4.当教室の喉頭癌症例を対象に癌細胞のレクチン組織化学的検索を行った結果、(1)異形上皮細胞ではSNAに対して8例中5例、細胞質に陽性所見が認められた。(2)癌細胞ではSNAに対する反応性が増強する一方、PNAに対しては反応性が減弱することが分かった。 5.本学部および病理学教室での喉頭癌24例、下咽頭癌27例の試料を用いて、糖鎖抗原(Tn、STn、T)およびムチンコア蛋白抗原(MUC1、MUC2)発現を検索した。その結果、1)乳腺型アポムチン関連抗原(DF3)は異型成扁平上皮49例中20例(41%)と扁平上皮癌51例中31例(61%)で、細胞膜のみならず細胞質内に発現がみられ、癌で細胞質内発現が顕著であった。2)T抗原は、異型成扁平上皮で59%、癌で76%の発現がみられ、悪性化で増加する傾向がみられた。 6.中国医科大学病院での喉頭癌102症例(男性73例、女性29例)のパラフィン包埋組織標本を用いてHPV DNAの検索および癌抑制遺伝子産物P53の検索を行った。組織切片よりDNAを抽出し、HPV-6、11およびHPV16、18、31、33、52bの各E6、E7領域をpu-31B、pu-2R、およびpu-1M、pu-2Rのプライマー対を用いてPCRを行った。PCR産物は電気泳動後、Southern blot hybridizationを行い、HPV DNAを検出した。また、PCR産物のバンドサイズおよびPCR産物の各種制限酵素切断パターン型別検索を行った。その結果、1)HVP陽性例は、102例中60例(58.8%)、その型別では、悪性型の16、18、33型が33例(55.0%)、良性型6、11型7例(11.7%)、6型と16型あるいは18型との混合例が20例(33.3%)であった。合併例は女性に多く、癌の進展例に多くみられた。2)HPV検出と性別、病変部位別、組織分化度別、リンパ節転移別との間では有意差を認めなかった。一方、P53の検出には単クローン抗体を用いて、ABC法により核内染色を行い検討した。その結果、1)P53は102例中60例(58.8%)に陽性であったが、HPV感染との間には有意な相関は認められなかった。2)性別、病変部位別、組織分化度別では相関はみられないが、頸部リンパ節転移との間で有意な相関が認められた(P<0.005)。 7.健常人の咽頭うがい液から約20%の割合でEBVゲノム(Subtype I型)が検出された。また、EBER-in situ hybridization(ISH)法と免疫染色を同一切片上で行い、EBVゲノムの発現と細胞表面形マーカーの検索を行う方法を確立した。これを鼻腔原発悪性リンパ腫に応用し、EBVゲノム(Subtype I型)を証明するとともにCD8陽性、supressor/cytotoxic T細胞の著明な浸潤像を観察した。