バゾプレッシン・オキシトシンによる生体調節機序の解明-分子生物学・形態学・薬理学及び生理学的アプローチ-

• 研究課題/領域番号: 07044296
• 研究種目: 国際学術研究
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 共同研究
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 山下 博 産業医科大学, 医学部, 教授 (00030841)
• 研究分担者: 上田 陽一 産業医科大学, 医学部, 講師 (10232745) ; 澁谷 泉 産業医科大学, 医学部, 助教授 (50162649) ; 稲永 清敏 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (90131903) ; 河田 光博 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (60112512) ; TRIBOLLET E. ジュネーブ大学, 医学部, 講師 ; KOIZUMI K. ニューヨーク州立大学, 医学部, 教授 ; PFAFF D.W. ロックフェラー大学, 神経生物&行動, 教授 ; DREIFUSS J.J ジュネーブ大学, 医学部, 教授 ; KOIZUMI K ニューヨーク州立大学, 医学部, 教授 ; PFAFF D.W ロックフェラー大学, 神経生物&行動, 教授
• 研究期間 (年度): 1995 – 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1996年度)
• 配分額: 4,000千円 (直接経費: 4,000千円); 1996年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 1995年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: バゾプレッシン / オキシトシン / 遺伝性多飲マウス / 遺伝子解析 / In situ hybridization法 / パッチクランプ法 / カルシウム画像解析

研究概要

バゾプレッシンおよびオキシトシンの持つ多岐にわたる生理作用のメカニズムを遺伝子レベルから行動レベルに至るまで一貫して、総合的に解析するための国際学術研究ををこなうことが本研究の目的であった。現在までに得られた成果の概要を以下に列記する。1.バゾプレッシンのアンチセンスDNAをラット脳内投与により多飲、多尿が引き起こされた。2.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシン遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。3.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンV2受容体遺伝子の塩基配列を決定したが、異常はなかった。4.遺伝性多飲マウスのバゾプレッシンおよびオキシトシンmRNAとそれぞれの脳内の局在は一致したが、バゾプレッシン遺伝子は視床下部で過剰に発現していた。5.遺伝性多飲マウスおよびコントロールマウスでバゾプレッシンV1受容体およびオキシトシン受容体の脳内分布をオートラジオグラフィー法により検討したところ、視床傍室核のバゾプレッシンV1受容体が、コントロールマウスに比べて遺伝性多飲マウスで多かった。オキシトシン受容体の脳内分布には明らかな差異はなかった。6.遺伝性多飲マウスの学習能力はコントロールマウスよりも優れていることが示唆された。7.パッチクランプ法を用いて、ラットおよびマウス脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンから電気記録を行ない、シナプス電流を解析した。また、視索上核から単離した神経分泌ニューロンを用いて、パッチクランプ法により電気記録を行った。8.カルシウム画像解析法を用いて、グルタミン酸受容体アゴニストの刺激により、単離した神経分泌ニューロンで細胞内カルシウム濃度が濃度依存性に上昇することが観察された。9.脳スライス標本の視索上核の神経分泌ニューロンからパッチクランプ法を用いた電気記録を行なうと同時に細胞内カルシウム濃度の同時測定に成功した。

研究成果

• [文献書誌] Tanaka,H.et al.: "Biphasic changes in behavioral,endocrine and sympathetic systems in adjuvant arthritis in Lewis rats." Brain Res.Bull.39(1). 33-37 (1996)
• [文献書誌] Tanaka,K.et al.: "PACAP causes rapid Ca^<2+> release from intracellular stores and long-lasting Ca^<2+> influx mediated by Na^+ influx-dependent membrane depolarization in bovine adrenal chromaffin cells." Endocrinology. 137(3). 956-966 (1996)
• [文献書誌] Kannan,H.et al.: "Activation of sympathetic outflow by recombinant human interleukin-1β in conscious rats." Am.J.Physiol. 270. R479-R485 (1996)
• [文献書誌] Nagatomo,T.et al.: "Proadrenomedullin N-terminal 20 peptide (PAMP) reduces inward currents and Ca^<2+> rises induced by nicotine in bovine adrenal medullary cells." Life Sciences. 59(20). 1723-1730 (1996)
• [文献書誌] Nomura,M.et al.: "PACAP type l receptor gene expression in the paraventricular and supraoptic nuclei of rats." NeuroReport. (1996)
• [文献書誌] Pfaff,D.W.et al.: "Hypothalamic cellular and molecular mechanisms helping to satisfy axiomatic requirements for reproduction." J-Neuroendocrinol.8(5). 325-336 (1996)
• [文献書誌] 長友,敏寿et al.: "バゾプレシンの分泌調節、In 治療学" Biomedicine & Therapeatics, 11-14 (1996)
• [文献書誌] 山下博et al.: "飲水行動 現代の神経内分泌学" メディカル・サイエンスインターナショナル, 255-260 (1996)
• [文献書誌] 山下博et al.: "浸透圧、体液量 現代の神経内分泌学" メディカル・サイエンスインターナショナル, 261-267 (1996)
• [文献書誌] 山下博et al.: "中枢におけるアドレノメデュリン Up Dataアドレノメデュリンのすべて" 現代医療, 99-102 (1996)
• [文献書誌] Ueta,Y.et al.: "Water deprivation induces regional expression of c-fos protein in the brain of inbred polydipsic mice." Brain Research. 677. 221-228 (1995)
• [文献書誌] Nagatomo,T.et al.: "Transient outward current in adult rat supraoptic neurones with slice patch-clamp technique : inhibition by angiotensin II." Journal of Physiology. 485. 87-96 (1995)
• [文献書誌] Yamaguchi,K.et al.: "Possible existence in the brain of neural mechanisms involved in inhibition of vasopressin release in the presence of an osmotic stimulus and angiotensin II." Exp.Clin.Endocrinol.14. 13-16 (1995)
• [文献書誌] Ueta,Y.et al.: "Does recurrent inhibition exist in the paraventricular magnocellular neurosecretory cells in the male rat?" Japanease Journal of Physiology. 45. 913-919 (1995)
• [文献書誌] Tanaka,K.et al.: "Potensiation of cholesystokinin-induced amylase release by peptide VIP in guinea pig pancreas acini." Japanease Journal of Physiology. 45. 241-256 (1995)
• [文献書誌] Ueta,Y.et al.: "Adrenomedullin-immunoreactive neurons in the paraventricular and supraoptic nuclei of the rat." Neuroscience Letters. 202. 1-4 (1995)
• [文献書誌] Yamashita,H.: "Fourth International Workshop of UOEH on Emotion,Stress and Metabolism" Journal of UOEH. 17. 299-320 (1995)
• [文献書誌] Osaka,T.et al.: "Activity of neurons in the lateral preoptic area during drinking behavior by the rat." Brain Research Bulletin. 36. 361-369 (1995)
• [文献書誌] Osaka,T.et al.: "Osmosensitive hypothalamic neurons and their responses to cardiovascular receptor activation." Brain Research Bulletin. 36. 371-379 (1995)
• [文献書誌] Yamamoto,S.et al.: "Cardiovascular-related peptides influence hypothalamic neurons involved in control of body water homeostasis" Obesity Research. 3. 789 (1995)
• [文献書誌] Inenaga,K.et al.: "GABA ergic inhibitory inputs to subfornical organneurons in rat slice preparations" Brain Research. 705. 85-90 (1995)
• [文献書誌] Tanaka,H.et al.: "Biphasic changes in behavioral,endocrine,and sympathetic systems in adjuvant arthoitis in Lewis rats" Brain Research Bulletin. 39. 33-37 (1996)
• [文献書誌] Niwa,K.et al.: "Temperature dependence of processes proxinal and distal to Glucose-induceel [Ca^<2+>] i rise in stimulus-secretion coupling in rat pancreatic islets" Biosignalling. (in press).
• [文献書誌] Tanaka,K.et al.: "PACAP causes rapid Ca^<2+> release from intracellilar stores and long lasting Ca^<2+> influx mediated by Na^+ influx-dependent membrane depolarization in bouine adrenal chromsffin cells" Endocrinology. (in press).
• [文献書誌] Funabashi,T.et al.: "Changes in preproenkephalin messenger RNA leuel in the rat ventromedial hypothalamus during the estrous cycle" Molecular Brain Research. 28. 129-134 (1995)
• [文献書誌] Kumamoto,K.et al.: "Oxytocin-producing and vasopressin-producing eosinophils in the mouse spleen : immunohistochemical immuno-electron-microscopic and in situ hykrization studies" Cell Tissue Research. 281. 1-10 (1995)
• [文献書誌] Ueda,S.et al.: "Role of neuropeptide Y projection on the development of serotonergic innervation in the suprachiasmatic nucleus of the rat,shown by tliple intraocular grafts" Brain Research. 673. 325-330 (1995)
• [文献書誌] Yamashita,H.et al.: "Neurohypophysis : Recent Progress of Vasopressin and Oxytocin Research" Elsevier Science B.V., 197-204 (1995)
• [文献書誌] 大坂寿雅 et al.: "THERAPEUTIC RESEARCH" ライフサイエンス出版株式会社, 32-35 (1995)