Dp71結合糖蛋白異常の脳神経細胞死における役割の細胞生物学的検討

• 研究課題/領域番号: 07264239
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 清水 輝夫 帝京大学, 医学部, 教授 (00107666)
• 研究分担者: 山田 広樹 帝京大学, 医学部, 助手 (90260926) ; 松村 喜一郎 帝京大学, 医学部, 助教授 (50260922)
• 研究期間 (年度): 1995 – 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1995年度)
• 配分額: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 1995年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 末梢神経 / シュワン細胞 / 髄鞘形成 / dystroglycan / laminin / シアル酸 / HNK-1 / 先天性筋ジストロフィー

研究概要

これまでに我々はdystroglycanが神経系にDp116(Dp71のホモローグ),utrophin (dystrophinのホモローグ)とともに発現し,laminin受容体であることを報告した.これらの結果よりdystroglycanが神経系の形態形成・維持に重要な役割を果たすことが推測される.さらに神経型アイソフォームであるlaminin-2を欠損する先天性筋ジストロフィー患者とその動物モデルであるdyマウスで中枢ならびに末梢髄鞘の形成が障害されている事実はdystroglycan-laminin-2相互作用が髄鞘形成に関与することを示唆する・平成7年度は主に末梢神経dystroglycanの生化学的構造解析を施行した.末梢神経の免疫組織化学的ならびに蛋白生化学的解析によりdystroglycanがシュワン細胞膜に,Dp116とutrophinがシュワン細胞体に局在すること,これらが複合体を形成するらしいことを明かにした.さらにシュワン細胞dystroglycanを蛋白生化学的に抽出する手法を開発した.これにより抽出dystroglycanの糖鎖構造解析を開始,レクチン,抗体の反応性よりdystroglycanがシアル酸を豊富に有し,HNK-1エピトープを持つムチン型糖蛋白であることを明かにした.神経内膜基底膜のlamininとの結合にはその糖鎖構造が,特に非還元末端のシアル酸の存在が重要であることを明かにした.現在dystroglycanの機能を阻害することにより髄鞘形成が実際に障害されるか観察する系を開発中である.

研究成果

• [文献書誌] Yamada H et al.: "Characterization of dystroglycan-laminin interaction in peripheral nerve" Journal of Neurochemistry. (in press).
• [文献書誌] Yamada H et al.: "Secretion of laminin α2 chain in cerebrospinal fluid" FEBS Letters. 376. 37-40 (1995)
• [文献書誌] Yamada H et al.: "Laminin abnormalities in severe childhood autosomal recessive......" Laboratory investigation. 72. 715-722 (1995)
• [文献書誌] kawai H et al.: "Adhalin gene mutations in patients with autosomal recessive......" Journal of Clinical Investigation. 96. 1202-1207 (1995)
• [文献書誌] Higuchi et al.: "Abnormal expression of heparan sulfate proteoglycan on basal......" Neuromuscular Disorders. 5. 467-474 (1995)
• [文献書誌] Toda T et al.: "Three dimensional MR imaging of brain surface anomalies in......" Muscle Nerve. 18. 508-517 (1995)