造血幹細胞増殖機構におけるTecチロシンキナーゼの解析

• 研究課題/領域番号: 07269216
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 間野 博行 自治医科大学, 医学部, 助教授 (90240704)
• 研究期間 (年度): 1995
• 研究課題ステータス: 完了 (1995年度)
• 配分額: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円); 1995年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
• キーワード: チロシンキナーゼ / サイトカイン

研究概要

造血前駆細胞に働くサイトカインとしてこれまでstem cell factor (SCF), IL-6が知られていたが、最近になってFlt3/Flk2受容体型チロシンキナーゼ(FR)のリガンドであるFlt3/Flk2-ligand (FL)も同様に造血前駆細胞の増殖を支持することが示された。我々はTecキナーゼがFL/FRを介する細胞増殖機構にも関与することを以下のように明らかにした。
FRを導入したマウスBaF/3細胞をIL-3またはFLで刺激後Tecを免疫沈降しそのリン酸化チロシンの有無を検討したところ、TecはFL及びIL-3刺激のどちらによってもリン酸化が誘導されることが示された。またTecはFL刺激にて活性化されるだけでなく、Tec homologyドメインを介してFRと細胞内で会合することも示された。次に生体内でのFL/FRsystemにおけるTecの機能を明らかにするための基礎実験として、マウス骨髄幼若単核球をFLを含む様々なサイトカイン存在下にて液体培養し、その後のCFU-mix形成能を検討した。その結果IL6+FLを添加した場合CFU-mix形成能が数百倍に増強することが示された。興味深いことにこの液体培養時にTecに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与することで、CFU-mix形成能の増強はブロックされた。したがってFL/FRを介する細胞内シグナルのなかでも、Tecは細胞増殖機構に関与すると考えられる。
以上よりTecは造血前駆細胞に働くサイトカイン群(SCF, IL-6, FL)による細胞増殖機構のcommon signal transducerであると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Mano, H., et al.: "Tec protein-tyrosine kinase is an effector molecule of Lyn protein-tyrosine kinase." FASEB J.(in press).
• [文献書誌] Kazama, A., et al.: "High expression of the tec gene product in murine testicular germ cells and erythroblasts." Pathol. Int.(in press).
• [文献書誌] Honda, H., et al.: "Expression of p210bcr/abl by metallothionein promoter induced T-cell leukemia in transgenic micc." Blood. 85. 2853-2861 (1995)
• [文献書誌] Machide, M., et al.: "Interleukin 3 and erythropoietin induce association of Vav with Tec kinase through Tec homology domain." Oncogene. 11. 619-625 (1995)
• [文献書誌] Nagle, D. L., et al.: "Physical mapping of the Tec and Gabrbl reveals that the Wsh mutation on mouse chromosome 5 is associated with an inversion." Hum. Mol. Genet.4. 2073-2079 (1995)
• [文献書誌] Yamagata, T., et al.: "Of the GATA-binding proteins, only GATA-4 selectively regulates the human interleukin-5 gene promoter in interleukin-5-producing cells which express multiple GATA-binding proteins." Mol. Cell. Biol.15. 3830-3839 (1995)