| 研究課題/領域番号 |
07276215
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| 研究種目 |
重点領域研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
曽我部 正博 名古屋大学, 医学部, 教授 (10093428)
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| 研究分担者 |
谷村 禎一 九州大学, 理学部, 助教授 (20142010)
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| 研究期間 (年度) |
1995
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| 研究課題ステータス |
完了 (1995年度)
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| 配分額 *注記 |
2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
1995年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
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| キーワード | 機械受容チャネル / 遺伝子クローニング / A6細胞 / ショウジョウバエ / アミロライド感受性チャネル / CGMP作動性チャネル |
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| 研究概要 |
機械受容(Mechanosensitive,MS)チャネルは、1984年に発見された新しい型のチャネルである。細胞の機械刺激感知を担う重要な分子であるが、その実態と構造が不明なために研究の進展が大きく阻まれている。現在、真核生物のMSチャネル遺伝子として最有力なのが、線虫の機械受容ミュータントの研究から分離されたmec遺伝子である。それは、mecと相同な遺伝子(rENaC)がラット腎細胞でアミロライド感受性イオンチャネルをコードすることが分かった(1993)からである。しかし実験材料の制約から、これらの遺伝子が機械受容チャネルをコードしているという直接証明がなされていない。本計画の目的は、電気生理学や遺伝学の実験に有利な材料(例えばショウジョウバエや腎細胞cell line,A6)から機械受容チャネルの遺伝子(例えばmecに相同な遺伝子)をクローニングし,MSチャネルの分子生物学と生理学がより広範に発展するための基盤を確立しょうというものである。本年度の成果は以下の通りである。
(1)ショウジョウバエの遺伝子ライブラリィから機械感覚受容に関連する可能性のある新しい型のcGMP作動性イオンチャネルと思われる遺伝子がクローニングされ、約70%の配列が決定された。現在配列決定の完成と抗体の作成が進行しており、今後その機能や発現パタンの解析を行う予定である。
(2)ゼノパス腎上皮由来のcell line(A6)において、アミロライド感受性Naチャネル(ENaC)が細胞体積調節に重要であることを発見した。これまでにゼノパス遺伝子ライブラリィからENaCのサブユニット(全部で3種類)のクローニングが終了し、今後強制発現やアンチセンスなどにより機能解析を行いこの遺伝子と機械受容の関連を明らかにする予定である。
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