エイズの病態と制御に関する基礎研究 柱5.感染と病態の制御

• 研究課題/領域番号: 07277103
• 研究種目: 重点領域研究
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 山本 直樹 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (00094053)
• 研究分担者: 島田 隆 日本医科大, 医学部, 教授 (20125074) ; 伊藤 正彦 山梨医科大学, 医学部, 教授 (90045740) ; 松下 修三 熊本大学, 医学部, 助手 (00199788) ; 志田 壽利 京都大学, ウイルス研究所, 助教授 (00144395) ; 多比良 和誠 筑波大学, 応用生物化学系, 教授 (10261778) ; 高久 洋 千葉工業大学, 工学部, 教授 (50101267)
• 研究期間 (年度): 1997
• 研究課題ステータス: 完了 (1997年度)
• 配分額: 137,400千円 (直接経費: 137,400千円); 1997年度: 46,800千円 (直接経費: 46,800千円); 1996年度: 46,800千円 (直接経費: 46,800千円); 1995年度: 43,800千円 (直接経費: 43,800千円)
• キーワード: HIV-1 / エイズ / ケモカイン / コレセプター / 阻害剤 / アンチセンス / 遺伝子治療 / Tat / HIV / V3 loop / リボザイム / Rev / クワシスピーシス / 中和モノクローナル抗体 / 硫酸アルキルオリゴ糖 / エイズ遺伝子治療 / V3loop

研究概要

ケモカイン、コレセプターおよびその阻害剤
Revの新規主要コファクターとしてhumanCRM1を同定した。またコファクターとして既報のRip/RABとの関係を調べることにより、Rev,CRM,Ripの3者(または4者)が複合体を形成していることを示唆した(志田)。アミノ酸18個よりなる低分子ペプチドT22がT細胞株指向性HIV-1のコレセプターであるCXCR4に特異的に吸着することにより、HIV-1の細胞への侵入を阻害することがわかった(山本)。
アンチセンス戦略と遺伝子治療
セカンドレセプターCCR5遺伝子を標的にしたアンチセンス核酸分子を構築し、その発現を阻害することで実際にウイルス感染を防ぐことができる可能性を示唆した(高久)。効果の高い抗HIV-1リボザイム発現系を構築した。転写後のリボザイムの高次構造を十分考慮して発現系を設計することの重要性が明らかとなった(多比良)。高力価のT細胞やマクロファージ特異的HIVベクターを作製し、高率で遺伝子を導入できることを示した(島田)。
病態、シグナル伝達およびHIVの転写調節
HIV蛋白のTatがIL-12産生を低下させることを見い出し、これによってもHIV感染者の免疫能が低下する可能性を示した(伊藤)。HIV感染の病態の解析と治療の開発のため免疫不全の進行要因としてのクワシスピーシスの解析(ウイルス側の要因)と免疫反応(宿主側の要因)の研究を行った(松下)。

研究成果

• [文献書誌] Y.Tanamka et al.: "Productive and lytic infection of human CD4+ type 1 helper T cells with macrophage-tropic human immuinodeficiency virus typel." J.Virol.71. 465-470 (1997)
• [文献書誌] D-S.An et al.: "High-efficiency transduction of human lymphoid progenitor cells and expression in differentiated T cells." J.Virol.71. 1397-1404 (1997)
• [文献書誌] Y.Koyanagi et al.: "Primary viremia and CNS inavasion with HIV-1 in a novel hu-PBL-immunodeficient mouse." J.Virol.71. 2417-2424 (1997)
• [文献書誌] T.Murakami et al.: "A small molecule CXCR4 inhibitor that blocks T cells-line tropic HIV-1 infection." J.Exp.Med.186. 1389-1393 (1997)
• [文献書誌] L.P.Neoh et al.: "The production of b-chemokines induced by HIV-2 envelope glycoprotein." AIDS. 11. 1062-1063 (1997)
• [文献書誌] H.Kaneko et al.: "Human immunodeficiency virus type2 envelope glycoprotein binds to CD8 as well as CD4 molecules on human T cells." J.Virol.71. 8918-8922 (1997)
• [文献書誌] 永井、野本、山本: "ウイルス最前線" 羊土社, 234 (1997)
• [文献書誌] 山本、山本: "ウイルスVS人体" 講談社, 206 (1997)
• [文献書誌] Y.Tanaka et al.: "Productive and lytic infection of human CD4+ type 1 helper T cells with macrophage-tropic human immunodeficiency virus type 1." J.Virol.71. 465-470 (1997)
• [文献書誌] Y.Koyanagi et al.: "Primary human immunodeficiency virus type 1 viremia and central nervous system inavasion in a novel hu-PBL-immunodeficient mouse strain." J.Virol. in press.
• [文献書誌] S.Tsukahara et al.: "Nonesymatic sequence-specific cleavage of duplex DNA via triple-helix formation by homopyrimidine phosphorothioatc oligonucleotides." Biooragic & Medicinal Chem.4. 2219-2224 (1996)
• [文献書誌] T.Kuwasaki et al.: "Hairipin antisense oligonucleotides containing 2′-methoxynucleotides with basepairing in the stem region at the 3′-end : penetration,Localization,and anti-HIV activity." Biochem.Biophys.Res.Commun.228. 623-631 (1996)
• [文献書誌] T.Kuwabara et al.: "Characterization of several kinds of dimer minizyme : simultaneous cleavage at two sites in HIV-1 rat mRNA by dimer minizymes." Nucleic Acids Research. 24. 2302-2310 (1996)
• [文献書誌] S.Fujita et al.: "Discrimination of a single base change in a ribozyme using the gene for dihydrofolate reductase as a selective marker in Escherichia coil." Proc.Natl.Acid.ci.USA. 94. 391-396 (1997)
• [文献書誌] T.Kiyoyama et al.: "Two distinct pathways for intronless mRNA expression : one rlated,and the other unrelated to human immunodeficiency virus Rev and human T-cell leukemia virus I Rex." submitted.
• [文献書誌] T.Nakajima et al.: "A T cell-selective putative CC chemokine receptor TESTR functions as a co-receptor for macrophage-tropic human immunodeficiency virus type 1 strains." submitted.
• [文献書誌] Y.Yoshimura et al.: "Relationship of HIV-1 envelope V2 and V3 sequences of the primary isolates to the viral phenotype." Micro.Immunol.40. 277-287 (1996)
• [文献書誌] K.Obaru et al.: "Gene therapy for adult T-cell leukemia using HIV vector carrying thymidine kinase of herpes simplex virus type1." Human Gene Therapy. 7. 2203-2208 (1996)
• [文献書誌] H.Nakashima et al.: "Sulfated pentagalloyl glucose(Y-ART-3)inhibits HIV replication and cytopathic effects in vitro,and reduces HIV infection in hu-PBL-SCID mice." Antiviral Research. 30. 95-108 (1996)
• [文献書誌] H.Nakashima et al.: "FR901724,a noivel anti-human immunodeficiency virus(HIV)peptide priduced by streptomyces,shows synergistic antiviral activities with HIV protease inhibitor and 2′,3′-dideoxynucleosides" Biol.Pharm.Bull.19. 405-412 (1996)
• [文献書誌] K.Miyake et al.: "Two step gene transfer using adenvirus vector carrying the CD4 gene and HIV vectors." Hum.Gene THer.18. 2281-2287 (1996)
• [文献書誌] K.Obaru et al.: "Gene therapy for adult T cell leukemia using human immunodeficiency virus vector carring the thymidine kinase gene of herpes simplex virus type 1." Hum.Gene THer.7. 2203-2208 (1996)
• [文献書誌] 山本直樹: "実験医学" 羊土社, 2291-2293 (1997)
• [文献書誌] J.Suzuki,et al.: "The association of antibodies against HTLV-1pX-gene mutant products with HTLV-1-associated myelopathy(HAM)/tropical spastic paraparesis(TSP)." J.Infect.Dis.(in press).
• [文献書誌] N.Yamamoto: "The role of cytokines in the acquired immunodeficiency syndrome." Int J Clin Lab Res. 25. 29-34 (1995)
• [文献書誌] T.Hatta,et al.: "Phosphorothioate oligonucleotides block reverse transcription by the RNase H activity associated with the HIV-1 polymerase." Biochem.Biophys.Res.Commun.211. 1041-1046 (1995)
• [文献書誌] K.Hosono,et al.: "Properties of base-pairing in the stem region of hairpin antisense oligonucleotides containing 2'-methoxynucleosides." Biochem.Biophys.Acta. 1244. 339-344 (1995)
• [文献書誌] T.Shimayama,et al.: "Generality of the NUX rule;Kinetic analysis of the results of systematic mutations in the trinucleotide at the cleavage site of hammerhead ribozymes." Biochemistry. 34. 3649-3654 (1995)
• [文献書誌] S.Sawata,et al.: "Kinetic evidence based on solvent isotope effects for the nonexistence of a proton-transfer process in reactions catalyzed by a hammeread ribozyme:Implication to the double-metal-ion mechanism of catalysis." J.Am.Chem.Soc.117. 2357-2358 (1995)
• [文献書誌] Y.Tanaka,et al.: "Induction of antibody responses that neutralize human T-cell leukemia virus type I infection in vitro in vitro and in vivo by peptide immunization." J.Virol.68. 6323-6331 (1994)
• [文献書誌] J.Katahira,et al.: "Effect of translation initiation factor elF-5A on the functioning of human T-cell leukemia virus type I Rex and human immunode ficiency virus Rev inhibited trans dominantly by a Rex mutant deficient in RNA binding." J.Virol.69. 3125-3133 (1995)
• [文献書誌] S.Matsushita,et al.: "Neutralizing monoclonal antobodies against human immunodeficirncy virus type 2gp120." J.Virol.69. 3333-3340 (1995)
• [文献書誌] S.Matsumi,et al.: "Neutralizing monoclonal antibody against an external envelope glycoprotein(gp110)of SIVmac251." AIDS Res.Hum.Retrov.6. 501-508 (1995)
• [文献書誌] H.Shang,et al.: "Suppression of HIV-1 reverse transcriptase activity by culture supernatants of mycoplasmas." Microbiology and Immunology. (in press).
• [文献書誌] H.Nakashima,et al.: "Sulfated alkyl oligosaccharides inhibit human immunodeficiency virus in vitro and provide sustained drug levels in mammals." Antiviral Chemistry & Chemotherapy. 6. 271-280 (1995)
• [文献書誌] T.Shimada,et al.: "Targeted gene transfer into CD4 positive cells by HIV based retrovital vectors." J.Acta Hematologica. (in press).
• [文献書誌] K.Tamayose,et al.: "A new strategy for large scale preparation of high titer recombinant adeno-associated virus(AAV)vectors by using packaging cell lines and sulfonated column." Hum.Gene Thera.(in press).