ニューロンモデルとしてのクロム親和細胞

• 研究課題/領域番号: 07308074
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 総合
• 研究分野: 神経科学一般
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 菅野 富夫 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (50009982)
• 研究分担者: 寺川 進 浜松医科大学, 光量子医学研究センター, 教授 (50014246) ; 熊倉 鴻之助 (熊倉 鴻之介) 上智大学, 理工学部, 教授 (70129790) ; 藁科 彬 新潟大学, 医学部, 助教授 (50064580) ; 柳原 延章 産業医科大学, 医学部, 助教授 (80140896) ; 中里 幸和 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (60001525) ; 持田 澄子 東京医科大学, 医学部, 講師 (30096341) ; 笠井 陽子 三菱化学生命科学研究所, プロジェクト4, 主任研究員 ; 桜井 隆 東京大学, 医学部, 助手 (70225845) ; 井上 和秀 国立衛生試験所, 薬理部, 室長 (80124379) ; 岩永 敏彦 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (10160128)
• 研究期間 (年度): 1995 – 1996
• 研究課題ステータス: 完了 (1996年度)
• 配分額: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円); 1996年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
• キーワード: クロム親和細胞 / 細胞質カルシウムイオン濃度 / 細胞膜イオン透過性 / プロテインキナーゼC / 受容体 / G蛋白系 / 細胞内ナトリウムイオン濃度 / 膜融合 / クロモグラニンA / 未分化クロム親和細胞 / ATP / アクチンフィラメント / シナプトタグミンン / 開口放出

研究概要

ラット副腎髄質細胞群の約60%では細胞質カルシウムイオン濃度(|Ca^<2+>|_c)に自発的にスパイク群が発生する。この自発性|Ca^<2+>|_cスパイク群はガンマーアミノ酪酸(GABA)によって抑制されることを報告した。このGABAの抑制効果はGABA_A受容体を介する細胞膜Cl透過性上昇に基づく過分極によって引き起こされることを確かめた(菅野)。培養ブタ副腎髄質細胞にNa^+蛍光指示薬であるSBFIを適用し、細胞内Na^+濃度測定のためのSBFI in vivo較正にはpalytoxinがgramicidinよりも適当であることを示した(中里)。副腎髄質からCa^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼIIの新しい内在性気質を分離した。その部分的ペプチドのアミノ酸配列を調べたところクロモグラニンA(分泌蛋白質)の配列と100%一致した。培養副腎髄質細胞を脱分極刺激すると細胞内のクロモグラニンAのリン酸化が増加した。この増加はカテコールアミン分泌の促進とよく相関していた(柳原)。ラット副腎髄質細胞をヒスタミンで刺激した時の細胞内情報伝達系はプロテインキナーゼC(PKC)の活性化を介するものであり、このPKC活性化による、刺激物質依存的な分泌応答修飾は、受容体/G蛋白系およびそれ以後の段階で起こることを示した(藁科)。クロム親和細胞からの開口分泌におけるシナプトタグミンC2A,C2Bドメインの役割について、C2A抗体及びC2B抗体、ならびにイノシトールポリリン酸(IHPS)を用いて解析を行った。IHPSのC2Bドメインへの結合は、静止時における自発性放出の抑制(クランプ)に働いており、刺激によって流入したCa^+がC2Aドメインに結合するとIHPSはC2Bドメインから解離して抑制が解除され、顆粒膜と細胞膜の融合が促進されるというシナプトタグミン・クランプ仮説を提唱した(熊倉)。ウシ副腎髄質のクロマフィン細胞を陰イオン色素(HPTS)を含む溶液に漬け共焦点型レーザー顕微鏡によって観察した。単一顆粒の開口放出に伴って時に生ずる大型の液胞構造は細胞膜の陥没によって生じたものであることがわかった(寺川)。

研究成果

• [文献書誌] Busik, J.: "Effects of GABA on spontaneous [Ca^<2+>]_c dynamics and electrical properties of rat adrenal chromaffin cells." Brain Research. 739. 97-103 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Warashina, A.: "Properties of intracellular calcium stores and their role in rat adrenal chromaffin cells." Biological Signals. 4. 195-205 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Warashina, A.: "Potentiation by indomethacin of receptor-mediated catecholamine secretion in rat adrenal medulla." Japanese Journal of Pharmacology. (印刷中). (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ohta, T.: "Characteristics of cytosolic Ca^<2+> elevation induced by muscarinic receptor activation in single adrenal chromaffin cells of the guinea pig." Cell Calcium. 20(3). 303-314 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Otsuguro, K.: "Modulation of Calcium current by ATP in guinea-pig adrenal chromaffin cells." Pflugers Archive European Journal of Physiology. 431. 402-407 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Misonou, H.: "Dissociation of SNAP-25 and VAMP-2 by MgATP in permeabilized adrenal chromaffin cells." Brain Research. 737. 351-355 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ohara-Imaizumi, M.: "Distinct roles of C2A and C2B domains of synaptotagmin in the regulation of exocytosis in adrenal chromaffin cells." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94. 287-291 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Terakawa, S.: "Dynamics of exocytotic release of catecholamine measured simultaneously by VEC-DIC microscopy and DC-amperometry." Japanese Journal of Physiology. 46(suppl)S7. (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "Phosphorylation of Chromogranin A and catecholamine secretion stimulated by elevation of intracellular Ca^<2+> in cultured bovine adrenal medullary cells." The Journal of Biological Chemistry. 271. 17463-17468 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Minami, K.: "Inhibitory effects of propofol on catecholamine secretion and uptake in cultured bovine adrenal medullary cells." Naunyn-Schimiedeberg's Archives of Pharmacology. 353. 572-578 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "CATECHOLAMINES ; BRIDGING BASIC SCIENCE WITH CLINICAL MEDICINE" Factors affecting adrenal medullary catecholamine biosynthesis and release. (in press), (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Busik, J.: "Effects of GABA on spontaneous [Ca^<2+>]_c dynamics and electrical properties of rat adrenal chromaffin cells." Brain Research. 739. 97-103 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Warashina, A.: "Properties of intracellular calcium stores and their role in rat adrenal chromaffin cells." Biological Signals. 4. 195-205 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Warashina, A.: "Potentiation by indomethacin of receptor-mediated cathecholamine secretion in rat adrenal medulla." Japanese Journal of Pharmacology. (in press). (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ohta, T.: "Characteristics of cytosolic Ca^<2+> elevation induced by muscarinic receptor activation in single adrenal chromaffin cells of the guinea pig." Cell Calcium. 20(3). 303-314 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Otsuguro, K.: "Modulation of Calcium current by ATP in guinea-pig adrenal chromaffin cells." Plugers Archive European Journal of Physiology. 431. 402-407 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Misonou, H.: "Dissociation of SNAP-25 and VAMP-2 by MgATP in permeabilized adrenal chromaffin cells." Brain Research. 737. 351-355 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ohara-Imaizumi, M.: "Distinct roles of C2A and C2B Domains of synaptotagmin in the regulation of exocytosis in adrenal chromaffin cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 94. 287-291 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Terakawa, S.: "Dynamics of exocytotic release of catechol-amine measured simultaneously by VEC-DIC microscopy and DC-amperometry." Japanese Journal of Physiology. 46(suppl)S7. (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "Phosphorylation of chromogranin A and catecholamine secretion stimulated by elevation of intracellular Ca^<2+> in cultured bovine adrenal medullary cells." The Journal of Biological Chemistry. 27. 17463-17468 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Minami, K.: "Inhibitory effects of propofol on catechoolamine secretion and uptake in cultured bovine adrenal medullary cells." Naunyn-Schimiedeberg's Archives of Pharmacology. 353. 572-578 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "Factors affecting adrenal medullary catecholamine biosynthesis and release" CATECHOLAMINES ; BRIDGING BASIC SCIENCE WITH CLINICAL MEDICINE. (in press). (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Busik, J.: "Effects of GABA on spontaneous [Ca^<2+>]_c dynamics and electrical properties of rat adrenal chromaffin cells." Brain Research. 739. 97-103 (1996)
• [文献書誌] Warashina, A.: "Properties of intracellular calcium stores and their role in rat adrenal chromaffin cells." Biological Signals. 4. 195-205 (1995)
• [文献書誌] Warashina, A.: "Potentiation by indomethacin of receptor-mediated catecholamine secretion in rat adrenal medulla." Japanese Journal of Pharmacology. (印刷中). (1997)
• [文献書誌] Ohta, T.: "Characteristics of cytosolic Ca^<2+> elevation induced by muscarinic receptor activation in single adrenal chromaffin cells of the guinea pig." Cell Calcium. 20(3). 303-314 (1996)
• [文献書誌] Otsuguro, K.: "Modulation of Calcium current by ATP in guinea-pig adrenal chromaffin cells." Pflugers Archive European Journal of Physiology. 431. 402-407 (1996)
• [文献書誌] Misonou, H.: "Dissociation of SNAP-25 and VAMP-2 by MgATP in permeabilized adrenal chromaffin cells." Brain Research. 737. 351-355 (1996)
• [文献書誌] Ohara-Imaizumi, M.: "Distinct roles C2A and C2B domains of synaptotagmin in the regulation of exocytosis in adrenal chromaffin cells." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94. 287-291 (1997)
• [文献書誌] Terakawa, S.: "Dynamics of exocytotic release of catecholamine measured simultaneously by VEC-DIC microscopy and DC-amperometry." Japanese Journal of Physiology. 46(suppl)S7. (1996)
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "Phosphorylation of Chromogranin A and catecholamine secretion stimulated by elevation of intracellular Ca^<2+> in cultured bovine adrenal medullary cells." The Journal of Biological Chemistry. 271. 17463-17468 (1996)
• [文献書誌] Minami, K.: "Inhibitory effects of propofol on catecholamine secretion and uptake in cultured bovine adrenal medullary cells." Naunyn-Schimiedeberg's Archives of Pharmacology. 353. 572-578 (1996)
• [文献書誌] Yanagihara, N.: "CATECHOLAMINES ; BRIDGING BASIC SCIENCE WITH CLINICAL MEDICINE" Factors affecting adrenal medullary catecholamine biosynthesis and release. (in press), (1997)
• [文献書誌] T.Iwanaga: "The involvement of macrophages and lymphocytes in the apoptosis of entero-cytes." Arch.Histol.Cytol.58. 151-159 (1995)
• [文献書誌] N.Inagaki: "Expression and role of ionotropic glutamate receptors in pancreatic islet cells." FASEB J.9. 686-691 (1995)
• [文献書誌] S.Koizumi: "Accentuation by pertussis toxin of 5-hydroxytryptamine-induced potentiation of ATP-evoked responses in rat pheochromocytoma cells." Neurosci.Lett.183. 104-107 (1995)
• [文献書誌] S.Koizumi: "Enhancement by zinc of ATP-evoked dopamine release from rat pheochromocytoma PC12 cells." Brain.Res.673. 75-82 (1995)
• [文献書誌] K.Inoue: "Glutamate-evoked release of adenosine 5'-triphosphate causing an increase in intracellular calcium in hippocampal neurons." NeuroReport. 6. 437-440 (1995)
• [文献書誌] S.Koizumi: "Contribution of L-type Ca^<2+> channels to long-term enhancement of high K^+-evoked release of depamine from rat striatal slices." Neurosci.Lett.187. 123-126 (1995)
• [文献書誌] K.Nakazawa: "Zinc potentiation of neurotransmission and inhibition of background cationic conductance in rat cultured hippocampal neurons." J.Physiol.(London). 484. 447-462 (1995)
• [文献書誌] S.Koizumi: "Inhibition by Zn^<2+> of uridine 5'-triphosphate-induced Ca^<2+>-influx but not Ca^<2+>-mobilization in rat phaeochromocytoma cells." Br.J.Pharmacol.115. 1502-1508 (1995)
• [文献書誌] S.Koizumi: "Inhibition by haloperidol of adenosine 5'-triphosphate-evoked responses in rat pheochromocytoma cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.210. 624-630 (1995)
• [文献書誌] D.Angaut-petit: "Mouse motor terminal immunoreactivity to synaptotagmin II during sustained quantal transmitter release." Brain Res.681. 213-217 (1995)
• [文献書誌] Y.Shoji-Kasai: "Synaptotagmin I is essential for Ca^<2+>-independent release of neurotransmitter induced by a-latrotoxin." FEBS Lett.353. 315-318 (1994)
• [文献書誌] S.Mochida: "Impairment of syntaxin by botulinum neurotoxin C_1 or antibodies inhibits acetylcholine release but not Ca^<2+> chennel activity." Neurosci.65. 905-915 (1995)
• [文献書誌] S.Mochida: "Role of myosin in neurotransmitter release:Functional studies at synapses formed in culture." J.Physiol.(paris). 89. 83-94 (1995)
• [文献書誌] W.Almers: "Molecular and Cellular Mechanisms of Neurotransmitter Release" Raven Press, 97-107 (1994)