| 研究課題/領域番号 |
07456097
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
水産化学
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| 研究機関 | 香川大学 |
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研究代表者 |
奥谷 康一 香川大学, 農学部, 教授 (00036013)
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| 研究分担者 |
茂田 士郎 福島県立医科大学, 教授 (00045634)
松田 政広 香川大学, 農学部, 助手 (50253258)
岡崎 勝一郎 (岡埼 勝一郎) 香川大学, 農学部, 教授 (60109733)
門谷 茂 香川大学, 農学部, 教授 (30136288)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
1996年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1995年度: 4,300千円 (直接経費: 4,300千円)
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| キーワード | 抗エイズウイルス / 硫酸多糖 / 抗ウイルス活性 / Cochlodinium / 海洋微細藻 / 多糖 |
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| 研究概要 |
(1) 瀬戸内海で採集し、研究室保存株の微細藻Cochlodinium polykrikoidesの無菌株を調製し、これを多糖生産株として維持し使用した。最初に微細藻の培養条件についてのデータを得るため、グロースキャビネットを用いて温度、光、通気条件培養時間を検討した結果から、培養は岡市らによる海水栄養塩添加培地(ESM)を用い、21°C、3500luxで行った。培養液を濾過し藻体を除いて得た上澄液からエタノール沈殿、Cetavlon沈殿により酸性多糖を集めた。透析後、凍結転燥して多糖標品を得た。これはDEAE-celluloseカラムクロマトにより1Mおよび2M NaClで溶出される画分に分かれ、分離・精製した多糖は、超遠心及びセルロースアセテート膜電気泳動分析で均一性の高いことが認められた。精製多糖の抗ウイルス活性試験にはMTT法を用いてEC50値を判定した。本多糖は、HIV-1に対して1.7μg/ml、FLUV-Aには0.45〜1.1μg/ml、同Bには7.1〜8.3μg/ml、PFLUV-2には0.8〜25.3μg/ml、RSV-Aには2.0〜3.0μg/ml、同Bには0.8μg/mlの濃度でEC50値を示し有効と認められた。これに対し、MLSV、PFLUV-3、MPSV、およびHSV-1には抗ウイルス活性を示さなかった。本多糖は、使用した細胞系に対して100μg/mlの濃度で全く細胞毒性を示さず、培養T細胞(MT-4)に対してはかえって増殖促進効果を示した。
(2) 本藻は、Gymnodinium A3に対するモノクローナル抗体に反応を示したことから、今後種の同定について注目する必要のあることが示唆された。本多糖の^<13>CNMR 分析から、5糖残基を基本とする多糖と推定された。糖としてマンノース、グルコース、ガラクトース、及びウロン酸が認められ、ウロン酸のカルボキシル基還元から、グルクロン酸と推定された。この他硫酸基が認められ、本多糖が示す抗ウイルス作用と関係が深いと推定したが、硫酸多糖に特有の抗血液凝固作用は見られなかった。
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