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豚における体外受精システムの開発に関する基礎研究

研究課題

研究課題/領域番号 07456123
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用動物科学
研究機関岡山大学

研究代表者

丹羽 晧二  岡山大学, 農学部, 教授 (40089115)

研究期間 (年度) 1995 – 1997
研究課題ステータス 完了 (1997年度)
配分額 *注記
6,800千円 (直接経費: 6,800千円)
1997年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1996年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1995年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
キーワード豚 / 卵成熟 / 体外受精 / 雄性前核 / 卵胞細胞 / 成熟培地 / 上皮成長因子 / システイン / グルタチオン / シスチン
研究概要

体外成熟豚卵子の体外受精において大きな問題とされてきた、雄性前核形成不全と高頻度の多精受精の原因を解明し、正常な受精の得られる系を開発することを目的として研究を進め、つぎのような成績を得た。
1.未熟卵子の細胞質成熟におよぼす上皮成長因子(EGF)と性腺刺激ホルモン(GTH;10IU eCG/ml+10IU bCG/ml)の相乗効果について調べ、EGFとGTHはいずれも細胞質成熟を促進したが、この効果は卵丘細胞を介して発現されることを明らかにした。
2.さらに培養条件を検討するために、異なる培地で培養した未熟卵子の成熟におよぼす牛胎児血清(FCS)、豚卵胞液(PFF)およびGTHの影響について調べた。成熟培地としてTCM-199BおよびWhittenの修正培地(mWM)を用いて比較した結果、異なる培地においてGT、FCSおよびPFFは卵子の成熟それぞれ異なる影響をおよぼすことが示唆された。また、PFFおよびGTを添加したmWM(mWM-FG)にさらに20種類のアミノ酸を添加した結果、細胞質成熟はより促進されるとともに、受精時に卵丘細胞が存在することによって雄性前核形成の促進されることを明らかにした。
3.システイン(CT)の細胞質成熟促進効果についてはすでに知られているが、その効果の発現が卵子の成熟段階に依存していることを明らかにした。また、CTとシスチンの卵子による利用性が卵丘細胞の有無により異なることを示唆する結果を得た。
4.第一成熟分裂途上の未熟卵子への精子侵入能の変化と細胞質内に侵入した精子核の変化について調べ、第一成熟分裂途上の未熟卵子の細胞質が精子の中期像染色体を形成する強い活性を有することを見いだした。

報告書

(4件)
  • 1997 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1996 実績報告書
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (26件)

  • [文献書誌] Wang, W.-H.: "Effects of epidermal growth factor(EGF)and gonadotropins on cumulus expansion and nuclear maturation of pig cocytes in a serum-free medium" Assisted Reproduction and Technology/Andrology. 7・1. 41-56 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.: "Functional analysis using chlortetracycline fluorescence and in vitro fertiligation of frozen-thawed ejaculatrl boar spermuto for incubated in a protein-free chemically defered medium" Journal of Reproduction and Fertibity. 104・2. 305-313 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.: "Synergistic affects of epidermal growth factor and gonadotropins on the cytoplasmic maturation of pig oocytes in a serum-free medium" Zygote. 3・4. 345-350 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K.: "Effects of cysteine in serum-free maturation medium on male prenuclear formation of maturing pig oocytes penetrated in vitro" Journal of Reproduction and Development. 43・1. 73-80 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.: "Transformation of sperm nuclei into metaphase chromosomes in maturing pig oocytes penetrated in vitro" Zygote. 5・2. 183-191 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K.: "Stage-specific requirement of cysteine duing in vitro maturation of porcine occytes for glatathione synthesis associated with mule pronucleay formation" Biology of Reproduction. 57・1. 1-6 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ka, H.-H.: "Effects of fetal calf serum,pig follicular fluid,and gonadotropins on maturation of pig oocytes cultured in different media" Journal of Mammalian Ova Research. 14・2. 198-204 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ka, H.-H.: "Amino acids in maturation medium and presence of cumulus cells of fertilization promote mule pronuclear formation in porcine oocytes matured and penetvatea in vitro" Biology of Reproduction. 57・6. 1478-1483 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K.: "Effects of cumulus cells on the ability of pig oocytes to utilize cysteine or cystine during maturation in vitro" Journal of Reproduction and Development. 44・2 (in press). (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.and Niwa, K.: "Effects of epidermal growth factor (EGF) and gonadotropins on cumulus expansion and nuclear maturation of pig oocytes in a serum-free medium" Assisted Reprod.Technol.Androl.7-1. 41-56 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H., Abeydeera, L.R., Fraser, L.R.and Niwa, K.: "Functional analysis using chlortetracycline fluorescence and in vitro fertilization of frozen-thawed ejaculated boar spermatozoa incubated in a protein-free chemically defined medium" J.Reprod.Fertil. 104-2.305-313 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.and Niwa, K.: "Synergistic effects of epidermal growth factor and gonadotropins on the cytoplsmic maturation of pig oocytes in a serum-free medium" Zygote. 3-4. 345-350 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K., Funahashi, H.and Niwa, K.: "Effects of cysteine in serum-free maturation medium on male pronuclear formation of maturing pig oocytes penetrated in vitro" J.Reprod.Dev.43-1. 73-80 (1997)

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    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Wang, W.-H.and Niwa, K.: "Transformation of sperm nuclei into metaphase chromosomes in maturing pig oocytes penetrated in vitro" Zygote. 5-2. 183-191 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K., Funahashi, H.and Niwa, K.: "Srage-specific requirement of cysteine during in vitro maturation of porcine oocytes for glutathione synthesis associated with male pronuclear formation" Biol.Reprod.57-1. 1-6 (1997)

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    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ka, H.-H., Wang, W.-H., Im, K.-S.and Niwa, K.: "Effects of fetal calf serum, pig follicular fluid, and gonadotropins on maturation of pig oocytes cultured in different media" J.Mamm.Ova Res.14-2. 198-204 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ka, H.-H., Sawai, K., Wang, W.-H., Im, K.-S.and Niwa, K.: "Amino acids in maturation medium and presence of cumulus cells at fertilization promote male pronuclear formation in porcine oocytes matured and penetrated in vitro" Biol.Reprod.57-6. 1478-1483 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sawai, K., Funahashi, H.and Niwa, K.: "Effects of cumulus cells on the ability of pig oocytes to utilize cysteine during maturation in vitro" J.Reprod.Dev.44-2 (in press). (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] SAWAI,Ken: "Effects of cysteine in serum-free maturation medium on male pronuclear formation of maturing pig oocytes penetrated in vitro" Journal of Reproduction and Development. 43・1. 73-80 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] SAWAI,Ken: "Stage-specific requirement of cysteine during in vitro maturation of porcine oocytes for glutatione synthesis associated with male pronuclear formation" Biology of Reproduction. 57・1. 1-6 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] WANG,W.-H.: "Transformation of sperm nuclei into mataphese chromosomes in maturing pig oocytes penetrated in vitro" Zygote. 5・2. 183-191 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] KA,H.-H.: "Effects of fetal calf serum,pig follicular fluid,and gonadotropins on maturation of pig oocytes cultured in different media" Journal of Mammalian Ova Research. 14・2. 198-204 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] KA,H.-H.: "Amino acids in maturation medium and pressence of cumulus cells at fertilization promote male pronuclear formation in porcine oocytes matured and penetated in vitro." Biology of Reproduction. 57・6. 1478-1483 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Ken SAWAI: "Effects of cysteine in serum-free maturation medium on male pronuclear formation of matyring pig oocytes penetrated in vitro" Journal of Reproduction and Development. 43(1) (予定). (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Ken SAWAI: "Stage-specufic requirement of cysteine during in-vitro maturation of porcine oocytes for glutathione synthesis associated with male pronuclear formation" Biology of Reproduction. (予定). (1997)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Wang,Weihua: "Synergetic effects of epidermal growth factor and gonadotropins on the cytoplasmic maturation of pig oocytes in a serum-free medium" Zygote. 3. 345-350 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書

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公開日: 1995-04-01   更新日: 2016-04-21  

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