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新しいカルシウム・リン脂質結合蛋白質、アネキシンVの生理機能に関する研究-視床下部・下垂体・卵巣系をモデルとした細胞生物学的研究-

研究課題

研究課題/領域番号 07456136
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 基礎獣医学・基礎畜産学
研究機関北里大学

研究代表者

汾陽 光盛  北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (00153007)

研究分担者 西原 真杉  東京大学, 農学部, 助教授 (90145673)
長谷川 喜久  北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (40092001)
久留主 志朗  北里大学, 獣医畜産学部, 助手 (50215076)
研究期間 (年度) 1995 – 1997
研究課題ステータス 完了 (1997年度)
配分額 *注記
7,600千円 (直接経費: 7,600千円)
1997年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1996年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1995年度: 5,600千円 (直接経費: 5,600千円)
キーワードアネキシンV / プロラクチン / LH / mRNA / 下垂体 / 卵巣 / 視床下部 / LHβサブユニット / 黄体形成ホルモン(LH) / 遺伝子発現 / 黄体 / プロジェステロン / ラット / アネキシン5 / カルシウム / 電気生理 / 繁殖生理
研究概要

(1)下垂体前葉でのアネキシンVの生理機能
アネキシンVは、下垂体前葉で細胞種に特異的に分布し、特にゴナドトロワに多量に含まれる。その合成が、視床下部のGnRHによって促進されること、下垂体前葉細胞初代培養系において、プロラクチン分泌を抑制し、LH分泌を著しく促進すること、LHに関しては、その合成をも促進することを証明し、新規の生理活性を明らかにした。
(2)卵巣におけるアネキシシVの生理機能
卵巣のアネキシンVは、黄体細胞に多量に分布し、顆粒層細胞にはほとんど存在しない。黄体細胞、中でも大型の黄体細胞に特異的にアネキシンVmRNAの存在すること、性周期の進行によってアネキシンVmRNAの発現量が変化し、特に発情前期に促進されることが明らかとなった。更に機能黄体ては、アネキシンVの分布が黄体機能の変化に伴って変動することを免疫組織化学法で明らかにし、黄体機能への関与を推定した。
(3)視床下部電気活動に対するアネキシンVの影響
ラットの視床下部切片を灌流し、SUA(single unit activity)を記録し、視床下部ニューロンの電気活動に対するアネキシンVの影響を観察した。腹内側核(VMH)を含む切片で観察したニューロンのうち、アネキシンVによって発火活動の促進されるもの、抑制されるものの混在することが示され、ニューロモシュレーターとしてのアネキシンVの作用が推定された。
(4)アネキシンVの測定系の開発
アネキシンVが分泌蛋白質であることを明らかにし、細胞外アネキシンVを測定することでその生理機能解明に必要な情報を入手出来ると考え、測定系の開発を目指した。まず組換えアネキシンVを作製し、これを抗原とした抗アネキシンV血清を用い、時間分解蛍光免疫測定法を開発した。同法が特異的で高感度なアネキシンVアッセイ系であることを確認した。

報告書

(4件)
  • 1997 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1996 実績報告書
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (136件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (136件)

  • [文献書誌] Kurusu S: "Detection of cytosolic phospholipase A2(cPLA2)in rat corpola lutea:relationship to functional luteolysis." J.Reprod.Dev.41. 141-147 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Madarame H: "Spontaneousrhabdomyosarcomas in aged mastomys (Praomys coucha)." Lab.Anim.29. 464-469 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takai S: "Pathogenesis of Rhodococcus equi infection in mice:Roles of vilurence plasmids andgranulomagenic activity of bacteria." FEMS Immunol Med Microbiol.11. 181-190 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawada T: "Decreased immunoreactive inhibin and increasedFSH levels in cryp-torchism after orchdopexy." Endocrine J.42. 577-580 (1995)

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  • [文献書誌] Kaneko H: "Changes inplasma concentrations of immunoreactive inhibin,estradiol and ESH associated with follicularwaves during the estrous cycle of the cow" J.Reprod.Develop.41(4). 311-320 (1995)

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  • [文献書誌] Kaneko H: "Immunoneutralization of inhibin and estradiol during the follicular phase of theestrous cycle in the cows." Biol.Reprod.53. 931-939 (1995)

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  • [文献書誌] Mine T: "Effects of inhibin on activin A-induced gulucose metabolism in rat hepatocytes." Endocrine. 5. 41-46 (1996)

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  • [文献書誌] Madarame H: "Immunohistochemical detection of virulence-associated antigens of Rhodococcus equi inpulmonary lesions of foals." Vet.Pathol.33. 341-343 (1996)

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  • [文献書誌] 水沼 英樹: "IR-インヒビン測定キットの有用性に関する検討" ホルモンと臨床. 44. 537-545 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 長谷川 喜久: "インヒビンとアクチビンの発見とその後の展開" 獣医畜産新報. 49(2). 129-133 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikeda A: "hGH transgenic rats expressing severe obesity and effect of treatment with hGH in a pulsatile manner." Endocrine J.43(Suppl). S99-S101 (1996)

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  • [文献書誌] Onami S: "Splenic macrophages alter the steroidgenesis of Leydig cells in vitro." EndocrineJ.43. 477-485 (1996)

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  • [文献書誌] Nishimura F: "Excitability of neurons in the ventromedial nucleus in rat hypothalamic slices:Modulation by amino acids at cerebrospinal fluid levels." Brain.Res.691. 217-222 (1995)

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  • [文献書誌] Suzuki M: "Hypothalamic gonadotropin-releasing hormone gene expression during rat estrous cycle." Endocrine J.42. 789-796 (1995)

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  • [文献書誌] Yamanouchi K: "Molecular cloning of cDNA for inhibin α-subunit from equine ovary." J.Vet.Med.Sci.57. 905-909 (1995)

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  • [文献書誌] Yoshida S: "Molecular cloning of cDNA for equine ovarian inhibin/activin β-subunit." J.Vet.Med.Sci.57. 469-473 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 松山 茂実: "ラット黄体退行をモデルとしたcDNAサブトラクション法によるプログラム細胞死最初期遺伝子の探索" 獣医畜産新報. 48. 117-118 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawaminami M: "Intrapituitary distribution and effects of annexin 5 on prolactin release" Endocrine. 5. 9-14 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Madarame H: "Virulent and avirulent Rhodococcus equi infection in T-cell deficient athymic unde mice:pathologic,bacteriologic and immunologic responces." FEMS Immunology and Medical Microbiology. 17. 251-262 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hasegawa Y: "Isolation and characterization of inhibin andinhibin-related proteins." J.Reprod.Develop.42(Suppl.). 23-25 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kaneko H: "Follicular growth and FSH secretion incattle." J.Reprod.Develop.42(Suppl.). 37-40 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshida S: "A novel steroid inhibitor for a rat 20α-hydroxysteroid dehydrogenase isozyme(HSD1)." Biol.Reprod.57. 1433-1437 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamanouchi K: "Inhibin α-subunit mRNA is expressed in the corpus luteum of the pregnant mare." J.Reprod.Develop.43. 267-270 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikeda A: "Different female reproductive phenotypes determined by human growth hormone(hGH)levels in hGH-transgenic rats." Biol.Reprod.56. 847-851 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirasawa M: "The rostral ventrolateral medulla mediates suppression of the circulatory system by the ventromedial nucleus of the hypothalamus." Brain.Res.724. 186-190 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishimura F: "Changes in chemical sensitivity of rat ventromedial hypothalamic neurons by food deprivation." Physiol.Behav.60. 7-12 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirasawa M: "Neural activity in the VMH associated with suppression of the circulatory system in rats." Physiol.Behav.59. 1017-1023 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Matsuyama S: "Occurrence of deoxyribonucleic acid fragmentation during prolactin induced-structural luteolysis in cycling rats." Biol.Reprod.54. 1245-1251 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Noguchi J: "Ontogeny of inhibin secretion in the testis:secretion of inhibin-related pro-teins from fetal Leydig cells and of bioactive inhibin from Sertoli cells." J.Endocrinology. 155. 27-34 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kaneko H: "Inhibin is involved in the suppression of FSH secretion in the growth phase of the dominantfollicle during the early luteal phase in cows." Domestic Animal Endocrinology. 14(4). 263-271 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kurusu S: "Role of cytosolic phospholipase A2 in eicosanoid generation by corpora lutea of pseudopregnant rat:effects of its specific inhibitor" Prostaglandins,Leukotrienes and Essential Fatty A cids. 57(2). 119-124 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawaminami M: "Immunocytochemical localization of annexin 5,a calcium dependent phospholipid binding protein,in rat endocrine organs" Cell and Tissue Research. (in press.). (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki M: "Identification of sex steroid-inducible genes in the hypothalamus of neonatal rats by cDNA subtraction." Neurosci.Lett.(in press.). (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Bannai M: "Effect of injection of antisense oligonucleotides of GAD isozymes into rat VMH on food intake and locomotor activity." Brain.Res.(in press.). (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawaminami M: "Ovariectomy enhances the expression of annexin 5 in the anterior pituitary gland and induces nuclear translocation in rat gonadotrophs" Moll.Cell.Endoc.(in press.). (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamanouchi K: "Equine inhibin/activin βA-subunit mRNA is expressed in the endometrial gland,but not in the trophoblast,during pregnancy." Mol.Repod.Develop.47. 1-7 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ordog T: "On the role of gonadotropin-releasing hormone(GnRH)in the operation of the GnRH pulse generator in the rhesus monkey." Neuroendocrinology. 65. 307-313 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 高橋 迪雄: "生殖機能と下垂体前葉機能調節系" ヒューマン・サイエンス. 9. 77-85 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoo MJ: "Involvement of prostaglandins in suppression of gonadotropin-releasing hormone pulse generator activity by tumor necrosis factor-a." J.Reprod.Develop.43. 181-187 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoo MJ: "Tumor necrosisfactor-a mediates endotoxin induced suppression of gona-dotropin-releasing hormone pulse generator activvity in the rat." Endocrine J.44. 141-148 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanuka H: "Prolactin expresses differential effect on apoptotic cell death of luteal cells in vivo and in vitro." Endocrine J.44. 11-22 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hasegawa Y: "Role of Inhibin and Activin in the Gonadal Development and Functions." Sugawara S,Umezu M and Tsijii H eds.,in"Embryo Transferand Genetic Micromanipulation",Sendai, 151-160 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishihara M: "Hypothalamic control of gonadotropin secretion in the rat:Electro-physiological study." Proceedings of Sixth Lake Shirakaba Conference 1994,Biology of Pregnancy,Nakayama T&Makino T(eds.),Keiseisha,Tokyo,11-20 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mizunuma H: "Evaluation of maternal serum inhibin as a marker for complicated pregnancy.in"Inhibin,Activin and Follistatin."" Eds.Aono T,Sugino H and Walw W,Springer-Verlag,New York,151-161 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishihara M: "Controlling mechanism of GnRH pulse generator activity in the rat.In:Neural Control of the Reproduction:Physiology and Behavior." Maeda K,Tsukamura H,Yokoyama A(eds)Japan Scientitic Societies Press,Tokyo/Karger,Basel,31-55 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hasegawa Y: "Inhibin and Activin:Novel Regulators for Gonadal Function and Sexual Maturation." in"SEXUAL DIFFERENTIATION AND MATURATION"Ares-Serono Symposia Publications,139-154 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hasegawa Y: "Two-site immunoassay for native inhibin A.in"Inhibin,Activin and Follistatin."" Eds.Aono T,Sugino H and Walw W,Springer-Verlag,New York,104-117 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki M: "Regulation of the expression of gonadotropin-releasing hormone gene in the hypothalamus.In:Reproductive Biology Update:Novel Tools for Assesment of Enviromental Toxicity." Miyamoto H,Manabe N(eds),Nakanishi Printing Co.,Kyoto,261-269 (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 西原 真杉: "脳と生殖-GnRH神経系の進化と適応-生殖の神経内分泌調節" 学会出版センター(印刷中), (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kurusu S,Shingaki, S,Munekata Y,Kawaminami M,Hashimoto I: "Detection of cytosolic phospholipase A2 (cPLA2) in rat corpola lutea : relationship to functional luteolysis" J.Reprod.Dev.41. 141-147 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Madarame H,KashimotoY,KawamotoT,Toyonaga S and Hasegawa Y: "Spontaneousrhabdomyosarcomas in aged mastomys (Praomys coucha)." Lab.Anim.29. 464-469 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takai S, Madarame H,Matsmoto C,Inoue M,Sasaki Y,Hasegawa Y,Tsubaki S and Nakane A: "Pathogenesis of Rhodococcus equi infection in mice : Roles of vilurence plasmids andgranulomagenic activity of bacteria." FEMS Immunol Med Microbiol.11. 181-190 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawada T,Yamanaka H and Hasegawa Y: "Decreased immunoreactive ingibin and increased FSH levels in crypotorchism after orchdopexy." Endocrine J.42. 577-580 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kaneko H,Kishi H,Watanabe G,Taya K,Sasamoto S and Hasegawa Y: "Changes inplasma concentrations of immunoreactive inhibin, estradiol and ESH associated with follicularwaves during the estrous cycle of the cow." L.Reprod.Develop.41(4). 311-320 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kaneko H,Nakanishi Y,Akagi S,Arai K,Taya K,Watanabe G,Sasamoto S and Hasegawa Y: "Immunoneutralization of inhibin and estradiol buring the follicular phase of theestrous cycle in the cows." Biol.Reprod.53. 931-939 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nishimura F,Nishihara M,Mori M,Torii K,Takahashi M: "Excitability of neurons in the ventromedial nucleus in rat hypothalamic slices : Modulation by amino acids at cerebrospinal fluid levels." Brain.Res.691. 217-222 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki M,Nishihara M,Takahashi M: "Hypothalamic gonadotropin-releasing hormone gene expression during rat estrous cycle." Endocrine.J. 42. 789-796 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamanouchi K,Yoshida S,Hasegawa T,Ikeda A,Chan KT,Matsuyama S,Nishihara M,Miyazawa K,Takahashi M: "Molecular cloning of cDNA for inhibin s-subunit from equine ovary." J.Vet.Med.Sci.57. 905-909 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshida S,Yamanouchi K,Hasegawa T,Ikeda A,Suzuki M,Chan KT,Matsuyama S,Nishihara M,Takahashi M: "Molecular cloning of cDNA for equine ovarian inhibin/activin bA-subunit." J.Vet.Med.Sci.57. 469-473 (1995)

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  • [文献書誌] Kawaminami M,Okazaki K,Uchida S,Marumoto N,Takehara K,Kurusu S,Hashimoto I,Walker AM: "Intrapituitary distribution and effects of annexin 5 on prolactin release." Endocrine. 5. 9-14 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mine T,Yasuda H,Fujita T and Hasegawa Y: "Effects of inhibin on activin A-induced gulucose metabolism in rat hepatocytes" Endocrine. 5. 41-46 (1996)

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  • [文献書誌] Hirasawa M,Nishihara M,Takahashi M: "The rostral ventrolateral medulla mediates suppression of the circulatory system by the ventromedial nucleus of the hypothalamus." Brain.Res.724. 186-190 (1996)

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公開日: 1995-04-01   更新日: 2016-04-21  

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