| 研究概要 |
下垂体前細胞における特定の機能発現を明らかにする目的で、我々は下垂体特異的蛋白転写活性因子Pit-1のalternative splicingによるisoformであるPit-1β,Pit-1Tの機能特異性に注目し,特異的なアミノ酸配列に対する抗体を作成し免疫組織化学(IHC)を行うと同時に特異的なoligonucleotide probeを作成してnon-radioisotopic in situ hybridization(ISH)を行った。ヒト下垂体および腺腫細胞においてPit-1βはGH細胞,Pit-1TはTSH細胞により強く発現し,それぞれ機能分化に関与する事が確認された。
また,近年視床下部ホルモンGH Releasing hormone(GHRH)や,エストロジェン・甲状腺ホルモン・レチノイドなどのレセプターとPit-1の相互作用が注目されている。これらのレセプターの局在をIHCおよびISH法を用いて検討した。PRL産生腺腫においてEstrogen receptor(ER)とPit-1の共存をCombined-ISH-IHC法を用いて検討し,またRetinoid X receptorとPit-1蛋白、mRNAの同一細胞での共存を報告した。GHRH-receptorに関しては微量遺伝子を組織切片上でPolymerase chain reaction(PCR)を用いて増幅し検出するin situ PCR法を導入し、GH産生細胞の機能分化やホルモン産生,細胞増殖に関与している事を細胞レベルで証明すべく検討を開始しその一部を報告した。
GHRH-receptorはhuman GHRH transgenic Ratの過形成およびGH産生下垂体腺腫で強く発現がみられ,Pit-1と同一細胞における発現を確認した。
本研究によって下垂体前葉細胞および下垂体腺腫細胞のGH,PRL,TSHの特異的発現におけるPit-1 isoformとEstrogen receptor,Retinoid X receptor,GHRH-receptorの特異的な関与が示唆された。
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