| 研究課題/領域番号 |
07457617
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
病態検査学
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
宇治 義則 熊本大学, 医学部, 助手 (90203512)
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| 研究分担者 |
岡部 紘明 熊本大学, 医学部, 教授 (20185466)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1996年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | キャピラリー電気泳動 / 血清蛋白分画 / アイソザイム分析 / LDアイソザイム / 免疫固定法 / 生物試料微量分析 / フリーゾーンキャピラリー電気泳動 / 生体試料微量分析 |
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| 研究概要 |
血清蛋白分画では20μmX25cmの未処理溶融化シリカカラムを用い、電解液として150mMホウ酸・水酸化ナトリウム緩衝液(pH10.0)を選択、試料量2nLを用い、10kVの電圧を印加し、ほぼ10種類の血清蛋白成分を同定、分析(約5分程度)できる方法を確立し、基準値の設定、従来法との相関関係、分析再現性、共存物質の干渉などの検討を行い、満足される結果を得た。さらに、本邦に最近、上市された全自動分析装置、パラゴンCZE200キャピラリー電気泳動装置の評価を行った。本装置は申請者が確立した分析法をほぼペースとして作られた装置である。血清蛋白分画分析法は完全自動化され、臨床検査現場に相応しいものと評価した。また、本装置でキャピラリー電気泳動法と免疫固定法を併用したM蛋白血症同定の臨床評価を行いモノクローナルなM蛋白血症については、迅速かつ簡便な分析法であることが確認されたが、ジク-ロナル、ポリクロナールなものでは確認が困難であり現在、改善法を研究中である。酵素アイソエンザイムについては、ゼロ電位法を用いた分析法を確立評価した。50μmX57cm(有効長50cm)のカラムを用い、電解液として乳酸およびNADを含んだトリス緩衝液(20mM,pH8.7)、試料量2nLを用い、10kV5分間電圧を印加後、電圧の印加を止め、酵素反応(30分間)をさせ、更に電圧を印加(10kV)し、酵素反応の結果生成するNADHを測定することにより血清中LDHアイソザイムを測定する方法を確立し、臨床的評価を行い満足する結果を得た。さらに、感度の上昇を目的としてレーザー励起蛍光による検出法の確立、CK、Alp、アミラーゼアイソザイム等の分析法の確立、評価を研究継続中である。
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