研究課題/領域番号 |
07458192
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研究種目 |
基盤研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
細胞生物学
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研究機関 | 久留米大学 |
研究代表者 |
目加田 英輔 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (20135742)
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研究分担者 |
馬田 敏幸 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (30213482)
岩本 亮 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (10213323)
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研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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配分額 *注記 |
7,400千円 (直接経費: 7,400千円)
1996年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
1995年度: 4,800千円 (直接経費: 4,800千円)
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キーワード | ジャクスタクライン / インテグリン / HB-EGF / CD9 / TM4ファミリー / ヘパラン硫酸プロテオグリカン / 膜結合型細胞増殖因子 / DRAP27 / CD63 / ジフテリア毒素リセプター / TPA |
研究概要 |
本研究は、CD9やインテグリンと細胞膜中で複合体を形成している膜結合型細胞増殖因子HB-EGFについて、複合体を構成する各分子を明らかにし、その作用機構を明らかにすることを目的としている。今回の研究では以下の成果を得た。 (1)HB-EGF、DRAP27/CD9、インテグリンの細胞内局在部位の決定。 サル腎由来のVero細胞におけるをHB-EGF、DRAP27/CD9、インテグリンの細胞内局在部位の決定を間接蛍光抗体法によって調べ、これらの蛋白が細胞間の接着部位(アドヘーレンスジャンクション近傍)に局在することを明らかにした。 (2)HB-EGFヘパリン結合部位の役割解析 HB-EGFのEGFドメインのN末側に存在するヘパリン結合部位(HBD)の役割を詳しく解析した。その結果、HBDはHB-EGFのマイトジェニック活性やジフテリア毒素結合活性そのものに直接必要ではなく、むしろそれらの活性を抑制していることが示唆された。 (3)HB-EGF-DRAP27/CD9-インテグリン複合体にアソシエ-トする他の分子の同定 Vero-H細胞の可溶化膜分画を抗インテグリンa3抗体や抗HB-EGFで免疫沈降して、共沈してくるタンパク質の同定を行なった。その結果、CD9と同じTM4ファミリーに属するCD63とCD81もこの複合体に含まれていることが明らかとなった。 (4)髄鞘での-DRAP27/CD9の発現解析 各種組織でのCD9の発現を調べた。その結果、中枢および末梢神経の髄鞘においてCD9の顕著な発現が認められた。これまで髄鞘において、TM4ファミリーの存在は全く知られておらず、髄鞘の形成と機能維持にこの蛋白が関わっているかどうかが今後の問題として提起された。
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