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細胞間接着部位に局在する、膜結合型細胞増殖因子-細胞接着因子複合体の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 07458192
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 細胞生物学
研究機関久留米大学

研究代表者

目加田 英輔  久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (20135742)

研究分担者 馬田 敏幸  久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (30213482)
岩本 亮  久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (10213323)
研究期間 (年度) 1995 – 1996
研究課題ステータス 完了 (1996年度)
配分額 *注記
7,400千円 (直接経費: 7,400千円)
1996年度: 2,600千円 (直接経費: 2,600千円)
1995年度: 4,800千円 (直接経費: 4,800千円)
キーワードジャクスタクライン / インテグリン / HB-EGF / CD9 / TM4ファミリー / ヘパラン硫酸プロテオグリカン / 膜結合型細胞増殖因子 / DRAP27 / CD63 / ジフテリア毒素リセプター / TPA
研究概要

本研究は、CD9やインテグリンと細胞膜中で複合体を形成している膜結合型細胞増殖因子HB-EGFについて、複合体を構成する各分子を明らかにし、その作用機構を明らかにすることを目的としている。今回の研究では以下の成果を得た。
(1)HB-EGF、DRAP27/CD9、インテグリンの細胞内局在部位の決定。
サル腎由来のVero細胞におけるをHB-EGF、DRAP27/CD9、インテグリンの細胞内局在部位の決定を間接蛍光抗体法によって調べ、これらの蛋白が細胞間の接着部位(アドヘーレンスジャンクション近傍)に局在することを明らかにした。
(2)HB-EGFヘパリン結合部位の役割解析
HB-EGFのEGFドメインのN末側に存在するヘパリン結合部位(HBD)の役割を詳しく解析した。その結果、HBDはHB-EGFのマイトジェニック活性やジフテリア毒素結合活性そのものに直接必要ではなく、むしろそれらの活性を抑制していることが示唆された。
(3)HB-EGF-DRAP27/CD9-インテグリン複合体にアソシエ-トする他の分子の同定
Vero-H細胞の可溶化膜分画を抗インテグリンa3抗体や抗HB-EGFで免疫沈降して、共沈してくるタンパク質の同定を行なった。その結果、CD9と同じTM4ファミリーに属するCD63とCD81もこの複合体に含まれていることが明らかとなった。
(4)髄鞘での-DRAP27/CD9の発現解析
各種組織でのCD9の発現を調べた。その結果、中枢および末梢神経の髄鞘においてCD9の顕著な発現が認められた。これまで髄鞘において、TM4ファミリーの存在は全く知られておらず、髄鞘の形成と機能維持にこの蛋白が関わっているかどうかが今後の問題として提起された。

報告書

(3件)
  • 1996 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (21件)

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すべて 文献書誌 (21件)

  • [文献書誌] Tsuneoka,M.: "c-myc activates RCC1 gene expression through E-box elements." Oncogene. (in press).

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakagawa,T.: "Amino-terminal processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor upregulates its juxtacrine but not its paracrine growth factor activity." J. Biol. Chem.271. 30858-30863 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura,Y.: "Expression and distribution of CD9 in myelin of the central and peripheral nervous systems." Am. J. Pathol.149. 575-583 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tsuneoka, M.: "c-myc activates RCC1 gene expression through E-box elements." Oncogene.(in press).

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakagawa, T.: "Amino-terminal processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor upregulates its juxtacrine but not its paracrine growth factor activity." J.Biol.Chem.271. 30858-30863 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura, Y.: "Expression and distrubution of CD9 in myelin of the central and peripheral nervous systems." AM.J.Pathol.149. 575-583 (1996)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mitamura.T.: "Diphtheria toxin binds to the EGF-like domain of human heparin-binding EGF-like growth factor/diphtheria toxin receptor and inhibits specifically its mitogenic activity." J.Biol.Chem.270. 1015-1019 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Higashiyama, S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF)." J.Cell.Biol. 128. 929-938 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakamura, K.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and DRAP27/CD9 form a complex with integrin 3 l at cell-cell contact sites." J.Cell.Biol. 129. 1691-1705 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Goishi, K.: "Phorbol ester induces the rapid processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor ; Conversion from juxtacrine to paracrine growth factor activity." Mol.Biol, Cell. 6. 967-980 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shishido, Y.: "Heparin-like molecules on the cell surface potentiate binding of diphtheria toxin to the diphtheria toxin receptor/membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor." J.Biol.C. 270. 29578-29585 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mekada, E.: Volume8 Bacterial toxins and virulence factors in desease. Moss, J., Iglewski, B., Vaughan, M.& Tu, A.T.(Marcel Dekker Inc., New York)Handbook of natural toxins, 15 (1995)

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      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tsuneoka,M.: "c-myc activates RCC1 gene expression through E-box elements." Oncogene. (in press).

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      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Nakagawa,T.: "Amino-terminal processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor upregulates its juxtacrine but not its paracrine growth factor activity." J.Biol.Chem.271. 30858-30863 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Nakamura,Y.: "Expression and distribution of CD9 in myelin of the central and peripheral nervous systems." Am.J.Pathol.149. 575-583 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Mitamura, T.: "Diphtheria toxin binds to the EGF-like domain of human heparin-binding EGF-like growth factor/diphtheria toxin receptor and inhibits specifically its mitogenic activity." J. Biol. Chem.270. 1015-1019 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Higashiyama, S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth facor (HB-EGF)." J. Cell Biol.128. 929-938 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Nakamura, K.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and DRAP27/CD9 form a complex with integrin 3 l at cell-cell contact sites." J. Cell Biol.129. 1691-1705 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Goishi, K.: "Phorbol ester induces the rapid processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor; Conversion from juxtacrine to paracrine growth factor activity." Mol. Biol. Cell. 6. 967-980 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Shishido, Y.: "Heparin-like molecules on the cell surface potentiate binding of diphtheria toxin to the diphtheria toxin receptor/membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor." J. Biol. Chem.270. 29578-29585 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Mekada, E.: "Handbook of natural toxins: Volume 8, Bacterial toxins and virulence factors in disease" Moss, J., Iglewski, B., Vaughan, M. & Tu, A. T. (Marcel Dekker Inc., New York), 15 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書

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公開日: 1995-04-01   更新日: 2016-04-21  

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