| 研究課題/領域番号 |
07557156
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
市川 厚 京都大学, 薬学部, 教授 (10025695)
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| 研究分担者 |
浜中 信行 小野薬品工業, 水無瀬創薬第一研究所, 所長
根岸 学 京都大学, 薬学部, 助教授 (60201696)
杉本 幸彦 京都大学, 薬学部, 助手 (80243038)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
15,800千円 (直接経費: 15,800千円)
1996年度: 6,500千円 (直接経費: 6,500千円)
1995年度: 9,300千円 (直接経費: 9,300千円)
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| キーワード | 遺伝子ターゲティング / プロスタノイド受容体 / 7回膜貫通型受容体 / G蛋白 / サブタイプ / 構造活性相関 / 細胞内情報伝達 / プロスタグランジン |
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| 研究概要 |
本研究の目的は、プロスタノイドの生体調節の全貌を理解し、その制御をする医薬品を開発するために、1.リガンド結合における構造活性相関と情報伝達の解析、2.受容体の組織特異的発現と受容体欠損マウスを用いた生理学的、病態形成的な研究を、京大グループと小野薬品工業グループの共同実験で行うことである。1.の成果は、(1)全てのプロスタノイド受容体に保存された第7膜貫通部位のアルギニン残基(Arg-309 : R309)がプロスタノイドリガンドのカルボン酸との会合とG蛋白活性化に重要であることを明らかにした。(2)この会合は、水素結合が必要充分であることをEP3受容体で明らかにした。(3)カルボニル基の非解離は、GsとGqの活性化に必須であるが、Giの活性化には関係ないことを明らかにした。2.の成果は、(1)各プロスタノイドのゲノム解析を行い遺伝子ターゲッテイングベクターを構築し、得られたcDNAをES細胞に導入し、相同組み換え細胞をクローニングし、胚細胞に注入し、これを偽妊娠マウスに戻し、キメラマウスを作製し、ホモのノックアウトマウスを作成することに成功した。(2) PGF受容体のノックアウトマウスの雌は、分娩において異常を起こすことがわかった。その成因は、PGF受容体の黄体特異的発現とそのアポトーシスによる退縮不能である。(3) EP2とEP4ノックアウトマウスの形質発現を検討中であるが、EP4ノックアウトマウスにおいて顕著な変化、すなわち生後1〜2日以内の循環系の障害により死亡がすることがわかった。今後は、個々のプロスタノイドの個々の部位における生理作用を分子レベルで明らかにし、それに適した形での医薬品開発の継続を行う予定である。これらの研究、特に1の研究において大量の超純水が必要であり、その製造システムを7年度に購入し研究成果を挙げた。
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