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マラリア原虫リボソームRNA遺伝子の特異的塩基配列を用いる原虫種識別DNA診断法

研究課題

研究課題/領域番号 07557301
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 生物系薬学
研究機関岡山大学

研究代表者

綿矢 有佑  岡山大学, 薬学部, 教授 (90127598)

研究分担者 新井 明治  岡山大学, 薬学部, 助手 (30294432)
山根 明男  湧永製薬株式会社, バイオ研究所, 主任研究員
木村 幹男  東京大学, 医科学研究所, 助手 (90114462)
根岸 和雄  岡山大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (70116490)
松岡 裕之  三重大学, 医学部, 講師 (10173816)
早津 彦哉  岡山大学, 薬学部, 教授 (10012593)
研究期間 (年度) 1995 – 1997
研究課題ステータス 完了 (1997年度)
配分額 *注記
4,300千円 (直接経費: 4,300千円)
1997年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1996年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
キーワードマラリア / マラリア原虫 / DNA診断法 / 18SrRNA遺伝子 / 卵形マラリア原虫 / PCR / 輸入マラリア / Microtiter plate-hybridization / 18S rRNA遺伝子 / DNA / 診断 / リボソーム / 原虫 / 熱帯熱 / 三日熱 / 卵型
研究概要

マラリア原虫18SrRNA遺伝子の特異的塩基配列に着目したマラリアのDNA診断法を開発した。これは、マラリアの古典的診断法である顕微鏡法の持つ欠点を克服しこれに代わり得るものである。本法を用いて、主として東京大学医科学研究所を受診したマラリアの疑いのある322名、747検体の臨床診断を行った。その結果、本法は4種のマラリア原虫の種別判定が可能であり、原虫種によって異なる治療方針の決定に役立つことが示された。また、低感染率のため顕微鏡法で見逃されがちなマラリア回復期での原虫も検出可能であることや、マラリアの再燃の予見が可能であることが示された。以上のことから本法の臨床診断における有用性は大きいことが明らかとなった。
さらに、これまで報告されている卵形マラリア原虫の18SrRNA遺伝子と異なる配列を有する卵形マラリア原虫変異体を、本法を用いて見出した。この原虫に感染した患者血液より抽出したDNAを用いて18SrRNA遺伝子全長の塩基配列の決定を行った。その結果約2.1kbpの3タイプの配列が得られた。マラリア原虫種間での18SrRNA遺伝子の相違は約10%であるが、これらの配列は卵形マラリア原虫のものと比較して約4%の相違であり、近縁のグループであると言える。次いで同じ患者の血液より抽出したRNAを用いて、この原虫が赤内型のステージで転写するタイプのRNAの配列を決定した。また我々は、新たに本原虫を特異的に検出し得るプレートの開発を行い、これを用いて我が国での臨床例から卵形マラリア原虫変異体を実際に検出した。
このように我々の開発したマラリアのDNA診断法は、臨床診断のみならず、新型原虫種の探索など学術目的にも有用であり、マラリア制圧のために大きく寄与し得ると考える。

報告書

(4件)
  • 1997 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1996 実績報告書
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (47件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (47件)

  • [文献書誌] Mikio Kimura: "Species-specific PCR detection of malaria parasites by microtiter plate hybridization : clinical study with malaria patients." J.Clin.Microbiol.33. 2342-2346 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake: "DNA Diagnosis of malaria using microtiter plate-hybridization." Nucleic Acids Symp.Ser.34. 241-242 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 綿矢 有佑: "ソロモン諸島国ガダルカナル島におけるマラリアのDNA診断" ソロモン諸島とマラリア. 51-62 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 木村 幹男: "マイクロタイタ-プレートハイブリダイゼーションを用いたPCR法のマラリア診療における有用性-特にマラリア回復期,急性期low parasitemiaの診断について-." 熱帯. 28. 16-25 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Meiji Arai: "A colorimetric DNA diagnostic method for falciparum malaria and vivax malaria : a field trial in the Solomon Islands." Nucleosides Nucleotides. 15. 719-731 (1996)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake: "PCR diagnosis of malaria at convalescent stage post-treatment." J.Travel Med.3. 119-121 (1996)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura: "Cases of ovale malaria and malariae malaria successfully treated with mefloquine." Jpn.J.Trop.Med.Hyg.24. 171-175 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 木村 幹男: "マラリア診療におけるPCR法の有用性." 臨床寄生虫研究会誌. 7. 49-51 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 木村 幹男: "マラリアの遺伝子診断" 臨床と微生物. 23. 149-155 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake: "A variant of Plasmodium ovale ; analysis of its 18S ribosomal RNA gene sequence" Nucleic Acids Symposium Series. 37. 293-294 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 木村 幹男: "急激な原虫数の増加と黒水熱を来した重症熱帯熱マラリアの症例" 治療学. 31. 105-107 (1997)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Meiji Arai: "DNA diagnosis of malaria in Guadalcanal,the Solomon Islands." Malaria Research In The Solomon Islands. 39-44 (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kinuko Iwasa: "Antimalarial activity and structure-activity relationships of protoberberine alkaloids." Eur.J.Med.Chem.33. 65-69 (1998)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hye-Sook Kim: "A potent antimalarial activity of 5-fluoroorotate in combination with sulfamonomethoxine against Plasmodium falciparum in vitro and Plasmodium berghei in mice." Parasitology International. (印刷中).

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshiaki Takeya: "Novel antimalarial guaiane-type sesquiterpenoids from Nardostachys chinensis roots." Tetrahedron Letters. (印刷中).

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  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "Species-specific PCR detection of malaria parasites by microtiter plate hybridization : clinical study with malaria patients." J.Clin.Microbiol.33. 2342-2346 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake et al.: "DNA Diagnosis of malaria using microtiter plate-hybridization." Necleic Acids Symp.Ser.34. 241-242 (1995)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yusuke Wataya et al.: "DNA diagnosis of malaria in Guadalcanal, the Solomon Islands. (Japanese)" Malaria in the Solomon Islands. 51-62 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "Usefulness of a PCR method using microtiter plate-hybridization in the clinical practice of malaria. (Japanese)" Tropics. 28. 16-25 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Meiji Arai et al.: "A colorimetric DNA diagnostic method for falciparum malaira and vivax malaria : a field trial in the Solomon Islands." Nucleosides Nucleotides. 15. 719-731 (1996)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake et al.: "PCR diagnosis of malaria at convalescent stage post-treatment." J.Travel Med.3. 119-121 (1996)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "Cases of ovale malaria and malariae malaria successfully treated with mefloquine. (Japanese)" Jpn.J.Trop.Med.Hyg.24. 171-175 (1996)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "Usefulness of a PCR method in the clinical practice of malaria. (Japanese)" Clin.Prasitol.7. 49-51 (1996)

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      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "DNA diagnosis of malaria. (Japanese)" Clin.Microbil.23. 149-155 (1996)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake et al.: "A variant of Plasmodium ovale ; analysis its 18S ribosomal RNA gene sequence." Nucleic Acids Symp.Ser.37. 293-294 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mikio Kimura et al.: "A case report of severe falciparum malaria with rapid increase of parasitemia and black water fever. (Japanese)" Chiryogaku. 31. 105-107 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Meiji Arai et al.: "DNA diagnosis of malaria in Guadalcanal, the Solomon Islands." Malaria Research In The Solomon Islands. 39-44 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kunuko Iwase et al.: "Antimalarial activity and structure-activity relationships of protoberberine alkaloids." Eur.J.Med.Chem.33. 65-69 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hye-Sook Kim et al.: "A potent antimalarial activity of 5-fluoroorotate in combination with sulfamonomethoxine against Plasmodium falciparum in vitro and Plasmodium berghei in mice." Parasitology International. (in pres.).

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshiaki Takeya et al.: "Novel antimalarial guaiane-type sesquiterpenoids from Nardostachys chinensis roots." Tetrahedron Letters. (in press.).

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1997 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Meiji Arai: "DNA diagnosis og malaria in Guadalcanal. Solomon Islands" Malaria Research in Solomon Islands. (印刷中).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Hye-Sook Kim: "A potent antimalarial activity of 5-fluoroorotate in combination with sulfamonomethoxine against Plasmodium falciparum in vitro and Plasmodium berghei in mice" Parasitol.Int.(印刷中).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Kinuko Iwasa: "Antimalarial activity and structure-activity relationships of protoberberine alkakoids" Eur.J.Med.Chem.(印刷中).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Yoshiaki Takaya: "Novel antimalarial guaiane-type sesquiterpenoids from Nardostachys chinensis roots" Tetrahedron Letters. (印刷中).

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake: "A variant of plasmodium ovale ; analysis of its 18S ribosomal RNA gene sequence" Nucleic Acids Sympo.Series. 37. 293-294 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] 木村幹男: "急激な原虫数の増加と黒水熱を来した重症熱帯熱マラリアの症例" 治療学. 31. 105-107 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Fumihiko Kawamoto: "Sequence variation in the 18S rRNA gene,a target for PCR-based malaria diagnosis,in Plasmodium ovale from southern Vietnam" Journal of Clinical Microbiology. 34(9). 2287-2289 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Hirofumi Miyake: "PCR diagnosis of malaria at convalescent stage post-treatment" Journal of Travel Medicine. 3(2). 119-121 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Meiji Arai: "A colorimetric DNA diagnostic method for falciparum malaria and vivax malaria : A field trial in the Solomon islands" Nucleosides & Nucleotides. 15(1-3). 719-731 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] S.Takatori: "Antiumor mechanism of 3′-ethynylcytidine (ECyd) and 3′-ethynyluridine (EUrd)" Nucleic Acids Sympo.Series. 35. 209-210 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kakutani: "Activation of c-fos and c-jun Genes and Protease Association in Cell Death Induced with 5-Fluoro-2′-deoxyuridine in Mouse MammaryTunor FM3A Cell Line" Nucleic Acids Symp.Ser.35. 269-270 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] S.Kankawa: "The Endonuclase S Relative to dNTP Imbalance Death" Nucleic Acids Symp.Ser.35. 271-272 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] M. Kimura: "Species-Speatic PCR Detection of Malaria Parasites by Microtiter Plate-Hybridization : Clinical Study with Malaria Datients" J. Clinical Microbiology. 33. 2342-2346 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] M. Arai: "A Cdourimetric DNA Diagro Method for Falciparum Malaria and vivax Malaria: a Field Trial in The Solomon Islands" Nucleosides & Nucleotides. 15(印刷中). (1996)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] H. Miyake: "PCR Diagnosis at convalescent stage" J. Inter. Travel. (印刷中). (1996)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] M. Miyake: "DNA Diagnosis of Malaria Using Minotiter Plate-hybridization" Nucleic Acids Symposium Ser.34. 241-242 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] 木村 幹男: "マイクロタイタ-プレートハイブリダイゼーションを用いたPCR法のマラリア診療における有用性-特にマラリア回復期・急性期lav panasitemiaの診断について-" 熱帯. 28. 16-25 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書

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公開日: 1996-04-01   更新日: 2016-04-21  

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