| 研究課題/領域番号 |
07557374
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 昭和大学 |
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研究代表者 |
野瀬 清 昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)
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| 研究分担者 |
松村 外志張 明治乳業ヘルスサイエンス研究所, 副所長
山元 俊憲 昭和大学, 薬学部, 教授 (30112741)
真下 順一 昭和大学, 薬学部, 助手 (60054045)
江川 清 昭和大学, 薬学部, 講師 (00095879)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
6,700千円 (直接経費: 6,700千円)
1997年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
1996年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
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| キーワード | p21遺伝子 / 薬物探索法 / ルシフェラーゼ / 薬物探索系 / WAF1遺伝子 / 薬物スクリーニング / p53蛋白質 / レドクス / 遺伝子発現 / WAF-1 |
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| 研究概要 |
本研究では、レドクス制御を受け、癌抑制遺伝子p53の標的でもあるWAF1/p21遺伝子の発現誘導を指標とし、生理活性物質の探索を行うことを目的とした。平成7、8年度でいくつかの探索系を構築し、それぞれの有用性を検討した結果、ヒトWAF1/p21遺伝子の5'上流-2400塩基(WWP/Luc)および-210塩基(WWP/Pst/Luc)のDNA断片をレポーターとしてのルシフェラーゼ遺伝子の連結したプラスミドをp53欠損細胞(Saos-2)またはp53変異細胞(TMK-1)に導入して安定に保持している細胞株を樹立し、探索系が確立された。WWP/Lucはp53応答エレメントを持ちp53依存的遺伝子発現を探索でき、WWP/Pst/Lucではp53非依存的誘導が探索される。今年度はこれらの探索系を用いて放射菌培養上清約1300種類をスクリーニングし、3種類の活性物質が見い出された。それぞれを精製し、構造の推定を行ったところ、アクチノマイシンD類似体、フレオマイシン、トリコスタチンAと同定された。未知の物質はまだ見い出されていないが、この探索系は生理活性物質の探索に有用であると考えられる。
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