| 研究課題/領域番号 |
07558106
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究分野 |
神経化学・神経薬理学
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| 研究機関 | 藤田保健衛生大学 |
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研究代表者 |
永津 俊治 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所・神経化学, 教授 (40064802)
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| 研究分担者 |
西井 一宏 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所・神経化学, 研究員 (50278305)
大江 瑞恵 (大江 端江) 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所・神経化学, 研究員 (10247661)
澤田 浩秀 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所・神経化学, 研究員 (30247663)
小林 和人 奈良先端科学技術大学院大学, 助教授 (90211903)
水口 智子 藤田保健衛生大学, 総合医科学研究所(神経化学), 研究員 (50247665)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
17,100千円 (直接経費: 17,100千円)
1996年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
1995年度: 14,400千円 (直接経費: 14,400千円)
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| キーワード | トランスジェニックマウス / イムノトキシン / 条件的破壊 / 神経変性 / ノルアドレナリンニューロン / 自律神経失調症 / パーキンソン病 / ハンチントン病 |
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| 研究概要 |
IL-2Rαを発現するトランスジェニックマウスに、脳室内または静脈内ヘイムノトキシン抗Tac-PE4を投与して、特定ニューロンを特定時期に選択的に破壊するIMCT法を開発した。この選択的細胞ターゲッティング法を応用して、ド-バミンβ水酸化酵素(DBH)プロモーター/IL-2Rα cDNA融合遺伝子を導入したDILトランスジェニックマウスにイムノトキシンを脳室内または静脈内へ投与して、中枢または末梢交感神経を選択的に破壊した動物を作製した。中枢ノルアドレナリンニューロンの破壊でDBH活性およびカテコールアミンの減少、運動量低下と運動障害を観察した。末梢交感神経の破壊で、交感神経の変性、脱落、組織中のカテコールアミンの減少、運動量、体重、体温の低下、心拍数の減少と心電図の異常を認めた。このDILマウスを用いて、中枢のノルアドレナリンニューロンの変性、または末梢交感神経の変性を伴った自律神経失調モデル動物を作製することが期待される。さらに、このIMCT法を応用して、パーキンソン病モデル動物およびハンチントン病モデル動物の作製を試みた。チロシン水酸化酵素(TH)プロモーター/IL2Rα cDNA融合遺伝子を導入したトランスジェニックマウスおよびジーンターゲッティング法を用いてドーパミンD2受容体遺伝子座にIL-2TRα遺伝子を導入したノックアウトマウスを作製した。これらのマウスの線条体にイムノトキシンの適当量を注入し、変性部位を組織学的に同定した。黒質-線条体系におけるドーパミンニューロンあるいはD2発現のGABAニューロンの選択的破壊によりパーキンソン病およびハンチントン病モデル動物の可能性を検索した。またIMCT法によりマウス胚性幹細胞における新しいネガディブ選択法を開発した。抗Tac-PE40でIL-2Rαを発現するES細胞を死滅させることに成功した。この新しいネガティブ選択法は相同組換体細胞のスクリーニングに有効である。
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