| 研究課題/領域番号 |
07558231
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 試験 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
永渕 昭良 京都大学, 医学研究科, 講師 (80218023)
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| 研究分担者 |
月田 早智子 京都大学, 医療技術短期大学部, 教授 (00188517)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
4,500千円 (直接経費: 4,500千円)
1996年度: 4,500千円 (直接経費: 4,500千円)
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| キーワード | αカテニン / スキルス胃癌 / APC / ES / 標的組み替え / F9 / 湿潤 / モデルマウス / ノックアウトマウス / ES細胞 / 癌抑制遺伝子 / 腫瘍 |
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| 研究概要 |
本研究においてはスキルス胃癌の原因の解明、及びその治療の可能性を探るためのモデルマウスの作成を目的としている。この目的のため、スキルス胃癌において高頻度で欠失し、原因遺伝子の一つである可能性の高いαカテニンのノックアウトマウスを作成し、このマウスでの発癌実験を行うことを試みる。
昨年度、通常のES細胞での標的組み替えからAPC変異ES細胞でのαカテニンの標的組み替えに方針を変更した。昨年度中にはこの目的の第一歩としてαカテニン遺伝子の単離に成功した。本年度は、1)ターゲッティングベクターの作成、2)相同組み替え細胞の単離を行った。キメラマウスでの解析を考慮に入れると、複数の標的組み替え細胞が必要になる。この目的のために高頻度で標的組み替えを起こすプロモータートラップ型のターゲッティングベクターの作成を行った。このベクターをES細胞に導入したが標的組み替え細胞は得られなかった。しかし、同じベクターを用いマウス奇形癌腫細胞F9において標的組み替えを試みたところ、約10%の高頻度で標的組み替え細胞を単離することが出来た。現在、ES細胞での標的組み替え細胞の単離が可能な培養条件の検討を進めている。
一方、F9細胞での高頻度標的組み替えが可能であることが判明したので、F9細胞でαカテニン遺伝子のダブルノックアウトを試みている。そのような細胞に腫瘍を形成させることにより、αカテニンの欠損が癌細胞の湿潤能に与える影響について解析を進めることが可能になる。
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