| 研究課題/領域番号 |
07671082
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
精神神経科学
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| 研究機関 | 大阪市立大学 |
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研究代表者 |
勝元 栄一 (1996-1997) 大阪市立大学, 医学部, 助手 (90271189)
古塚 大介 (1995) 大阪市立大学, 医学部, 講師 (70199438)
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| 研究分担者 |
木岡 哲郎 大阪市立大学, 医学部, 助手 (40254396)
勝元 栄一 大阪市立大学, 医学部, 助手 (90271189)
横谷 昇 大阪市立大学, 医学部, 講師 (10244641)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1997
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| 研究課題ステータス |
完了 (1997年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1997年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1996年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1995年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | protein kinase C / convulsion / Translocation / epilepsy / translocation / ep:lespy |
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| 研究概要 |
(結果)
1.PTZ誘発痙攣
1)PKC活性
大脳皮質で痙攣後10分の細胞質画分がPKC活性が対照、痙攣前駆期、強直痙攣期に比べ有意に亢進していたが、膜画分では有意な差は認められなかった。海馬、線条体、視床・視床下部の3部位ではPTZ誘発痙攣で細胞質、膜画分とも有意なPKC活性の変化がみられなかった。
2)Western blotting
痙攣後10分で細胞質画分の80KPKC-βが増加し、膜画分では減少していた。また、細胞質画分で強直痙攣期および痙攣後10分で50KPKC-βが出現していた。PKC-αでも同様な傾向が見られたが、PKC-γ、δ、ε、ζでは痙攣による変化がみられなかった。
3)Calpain活性
大脳皮質の細胞質画分および膜画分のCalpain活性は対照に比べ、痙攣前駆期、強直痙攣期、痙攣後10,30,90分で有意な差は認められなかった。
2.ELマウスの発作
1)RT-PCRによる各PKCisozymeの発作後の変化
PKCαは発現量は少なく、発作間欠期より徐々に低下した。PKCβも発現量は少なかったが、間欠期より徐々に上昇した。PKCγは豊富に発現し、発作30分後にピークとなり、120分後に間欠期のレベルに戻った。PKCδは発現量は少なかったが、発作30分後にピークを示した。
(考察)
PTZ痙攣では大脳皮質におけるPKC-α、βの細胞膜から細胞質へのtranslocationが生じ、細胞質のPKC活性が増加した。また強直痙攣期の細胞質における50KのPKC免疫活性は、痙攣後の比較的早期の変化であり、CalpainによるPKCの限定分解によるものではないと考えられた。
また、RT-PCRによるELマウス発作後のPKC isozumeの変化は、PTZ痙攣後の結果とは異なる発現パターンを示し、さらにnorthernおよびwestern blotによって検討したい。
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