| 研究課題/領域番号 |
07671249
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
吉川 徳茂 (吉川 徳成) 神戸大学, 医学部, 教授 (10158412)
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| 研究分担者 |
飯島 一誠 神戸大学, 医学部, 助手 (00240854)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
1996年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1995年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | アルポート症候群 / 遺伝子 / IV型コラーゲンα5鎖 / エフソン / IV型コラーゲン / RT-PCR / direct sequence / mRNA |
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| 研究概要 |
【背景】アルポート症候群の大部分はX連鎖型で、X染色体上に存在するIV型コラーゲンα^5遺伝子の変異により起こると考えられている。これまでゲノムDNAを用いたSSCP法にて遺伝子解析がされているが、変異の検出率は50%以下である。この低検出率の原因として、ゲノムDNAレベルでは検出困難な変異の存在とSSCP法の感度の低さが考えられる。
【目的】mRNAレベルでのダイレクトシークエンス法による遺伝子解析法を開発し、X連鎖型アルポート症候群の遺伝子診断法を確立する。
【対象・方法】糸球体・皮膚基底膜α^5鎖蛋白の異常を認めたX連鎖型アルポート症候群22家系22例(男児13例、女児9例)を対象とし,末梢血白血球からRNAを抽出しRT-PCR・ダイレクトシークエンス法によりIV型コラーゲンα^5鎖全遺伝子を解析した。
【結果・考察】RT-PCR・ダイレクトシークエンス法によりIV型コラーゲンα^5鎖mRNA全域の解析が可能であった。その結果、男児は13例全例(100%)、女児は9例中7例(78%)で遺伝子変異がみつかり、全体の検出率は91%と極めて高率であった。変異の発見できなかった女児では、正常なRNAのみがPCRで増幅された可能性が考えられ、再検中である。
【結論】RT-PCR・ダイレクトシークエンス法によるRNAレベルでの遺伝子解析は、X連鎖型アルポート症候群の遺伝子診断法として高感度で実用的な方法である。
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