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レーザー光を用いた人工臓器、細胞移植のためのハイブリドーマ作成方法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 07671356
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 消化器外科学
研究機関東北大学

研究代表者

加藤 博孝  東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (00240656)

研究分担者 大河内 信弘  東北大学, 医学部, 講師 (40213673)
土井 秀之  東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (90188839)
佐藤 俊一  東北大学, 素材工学研究所, 助教授 (30162431)
研究期間 (年度) 1995 – 1996
研究課題ステータス 完了 (1996年度)
配分額 *注記
400千円 (直接経費: 400千円)
1996年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
キーワードマイクロプロセシング / 細胞融合 / ミエローマ細胞(SP2) / シオクタロニ-法 / マイクロプロセスィング / ハイブリドーマ / レーザー / SP2 / レーザートラッピング
研究概要

我々は,レーザーのマイクロプロセシング技術を応用し,レーザーを用いて顕微鏡下で無菌かつ非接触操作による,目的の細胞どうしを選択的に融合させる新しい細胞融合法を開発した.これは,任意の2個の細胞をレーザーを用いて捕捉・移動・近接させ,パルスレーザーにて両細胞にピンホールをあけ,融合させる方法である.そして,マウスのmyelona cell(SP2)とマウスの脾臓から分離したリンパ球の細胞融合に成功し,融合細胞がHAT培地でも生存し,増殖し続けることを確認した.さらに,融合細胞がIgGを産生していることを免疫法(オクタロニ-法)で検出し,融合細胞がIgG産生hybridomaであることを証明した.この研究から,細胞どうしの接触状態,細胞膜の硬さ,核の大きさ,細胞質の量等も融合率に影響を与え,SP2のような細胞質の豊富な細胞どうしの細胞融合は容易であるが,リンパ球のように細胞質が少なく,ほとんど核だけで細胞膜の硬い細胞どうしの融合は比較的困難であることが判明した.また,マウス肝実質細胞のような大型の細胞を捕捉するための条件の検討を行い,マウス肝実質細胞では,SP2に比べ,約5倍のレーザー出力を必要とすることが判明した.以上,大型の細胞を用いて細胞融合を行うためには,さらなる検討が必要であるが,本法は,極めて少数の目的細胞の,1対1の選択的な細胞融合が高い効率で可能であるという特徴があり,いままでの細胞融合法では融合が難しいとされていた細胞にも応用可能であると考えられる.

報告書

(3件)
  • 1996 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Itagaki H.,et al: "Selective selection method by Laser de vice" Acta Histochemica et Cytochemica. vol29sup. 750-751 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 板垣英雄、他: "レーザーを用いた新しい選択的細胞融合法の開発" 薬理と臨床. vol6,8. 1535-1538 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] ITAGAKI HIDEO et al.: "New Method of Selective Cell Fusion by LASER." Clinical Pharmacology and Therapy.Vol.6 No.8. 1535-1538 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Itagaki, H.Doi, N.Ohkohchi, S.Satoh, S.Satomi, Y.Taguchi: "New Method of Selective Cell Fusion by LASER (Analysis of the function of the fusion cells)" The Japanese Journal of Artificial Organs.Vol.25 Suppl ISSN S-99. (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Itagaki H., Doi H., Ohhohchi N., Satomi S., and Taguchi Y.: "Selective Cell fusion Method by Laser Device" 10th International Congress of Histochemistry and Cyochemistry.750-751 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 坂坦英雄,大河内信弘,里見進: "レーザーを用いた新しい選択的細胞融合法の開発" 薬理と臨床. 6巻8号. 1535-1538 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書

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公開日: 1996-04-01   更新日: 2016-04-21  

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