| 研究概要 |
眼アレルギー疾患の炎症細胞の浸潤を解明する目的で、結膜局所に浸潤している炎症細胞の定量的解析、に炎症細胞の浸潤関与するサイトカインについてELISA法およびPCR法をもちいて検討を行った。
1.炎症細胞の定量的解析
ブラッシュサイトロジーにより結膜上皮内の細胞を採取し,採取された細胞300個あたりの炎症細胞の比率を比較した.好酸球および肥満細胞の細胞数は低く定量的評価には適していなかったが、角結膜上皮障害を有する重症型のアレルギー性結膜炎である春季カタルでは好酸球の出現率は高かった。
2.ELISA法をもちいたサイトカインの検索
涙液中のRANTESおよびIL-4についてELISA法により測定した。RANTESは、アレルギー性結膜炎全例に検出されたが正常コントロールの涙液からは検出されなかった。一方、IL-4は、春季カタルに陽性を認めがた、他のアレルギー性結膜炎では、陰性であった。
3.結膜組織におけるRANTESの免疫組織学的検討
春季カタル患者の上眼瞼瞼結膜の石垣状乳頭部の組織をアセトン固定後、抗ヒトRANTESモノクローナル抗体(マウス)を一次抗体として免疫組織化学で検討した。結膜上皮細胞は、基底細胞およびその直上の中間細胞に陽性を認めたが、正常結膜には、陽性所見は得られなかった。
4.RT-PCR法を用いたサイトカイン発現の検索
ブラッシュサイトロジーにより結膜上皮内から採取した細胞に対し、RT-PCR法によりサイトカインの発現を検討した。重症の春季カタルでは、季節性アレルギー性結膜炎および通年性アレルギー性結膜炎に比べRANTES、IL-4、TNF-α,IFN-γが高頻度に認められた。重症の春季カタルの結膜上皮内における炎症性サイトカインおよびケモカインの発現の上昇は、アレルギー性炎症の重症化に関与していることが推測された。
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