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細胞内情報伝達におけるレセプター会合体の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 07672373
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 生物系薬学
研究機関名古屋市立大学

研究代表者

古野 忠秀 (1996)  名古屋市立大学, 薬学部, 助手 (80254308)

鳥越 智香子 (1995)  名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (70237163)

研究分担者 古野 忠秀  名古屋市立大学, 薬学部, 助手 (80254308)
研究期間 (年度) 1995 – 1996
研究課題ステータス 完了 (1996年度)
配分額 *注記
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1996年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1995年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード情報伝達 / レセプター / カルシウムイオン濃度 / 画像解析 / B細胞 / 好塩基球細胞 / ハプテン / 抗原
研究概要

細胞内情報伝達におけるレセプター会合体の機能を明らかにするため、まず、分子量、ハプテン密度、表面電荷などの異なる抗原蛋白質を作製した。同一ハプテンを特異的に認識するB細胞ハイブリドーマ(TP67.21)と好塩基球白血病細胞株(RBL-2H3)を用いて、抗原蛋白質で活性化されたときの細胞内カルシウムイオン濃度、抗体産生量、脱顆粒量などを測定したところ、両者の細胞間で違いがみられた。また、ハプテンを組み込んだ硬さの異なるリポソームを用いてTP67.21およびRBL-2H3を抗原刺激しても両細胞間に違いが見られた。この結果は、いずれも、RBL-2H3には細胞膜上のレセプターと抗原蛋白質との間に柔軟なIgE分子が存在していることによるものと考えられた。また、カルシウムプローブと蛍光標識したIgE分子をRBL-2H3に負荷し、共焦点レーザ顕微鏡により細胞内カルシウムイオン濃度とIgE分子の動態を単一生細胞で同時にリアルタイムで観察することに成功した。その結果、IgE分子の細胞膜上での会合はカルシウムイオン濃度が上昇した後も長期にわたって観察された。しかし、カルシウムイオン濃度が高いレベルで持続しているところに、単量体のハプテンを高濃度加えるとカルシウムイオン濃度は元のレベルまで減少し、レセプターの会合体は速やかに消失することが明らかになった。
また、変異IgEレセプターを発現させた肥満細胞を用いてレセプターの会合体の形成と脱顆粒反応を単一細胞で追究した。その結果、レセプターの取り込みや脱顆粒反応に至る細胞内情報伝達機構の活性化の誘導には、IgEレセプターのβ鎖およびγ鎖のC末端ドメインが重要であることが明らかになった。

報告書

(3件)
  • 1996 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1995 実績報告書
  • 研究成果

    (19件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (19件)

  • [文献書誌] Okamoto,Y.: "Confocal fluorescence microscopy for studying thapsigarpin-induced bivalent-cation entry into B cells." Biochem.J.305. 1011-1015 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakanishi,M.: "Confocal fluorescence microscopy for studying signal transduction in mast cells and basophils." Zoological Studies. 34. 38-40 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Furuno,T.: "Surface expression of CD63 antigen(ADl antigen)in P815 mastocytoma cells by transfected IgE receptors." Biochem.Biophys.Res.Commun. 219. 740-744 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe,T.: "Confocal fluorescence microscopy for antibodies against a highly conserved sequence in SH2 domains." Biochem.Biophys.Res.Commun. 223. 245-249 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ohyama,N.: "Crossbridge rigidity acts differently on mIgM and IgE receptor-mediated calcium signals." Biomages. 4. 157-159 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Torigoe,C.& Nakanishi,M: "Quantitative and realtime correlation between receptor aggregation and intra cellular calcium signal transduction." Immunology Letters.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 中西 守: "細胞内カルシウム実験プロトコール(実験医学別冊)" 羊土社, 198 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 古野忠秀: "見る技術(蛋白質 核酸 酵素 増刊号)" 共立出版(印刷中),

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okamoto, Y., Furuno, T., Hamano, T., Nakanishi, M.: "Confocal fluorescence microscopy for studying thapsigargin-induced bivalent-cation entry into B cells" Biochem.J.305. 1011-1015 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakahishi, M., Furuno, T., Teshima, R.: "Confocal fluorescence microscopy for studying signal transduction in mast cells and basophils" Zoological Studies. 34. 38-40 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Furuno, T., Teshima, R., Kitani, S., Sawada, J., Nakanishi, M.: "Surface expression of CD63 antigen(ADI antigen) in P815 mastocytoma cells by transfected IgE receptors" Biochem.Biophys.Res.Commun. 219. 740-744 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okada, T., Teshima, R., Furuno, T., Torigoe, C., Sawada, J., Nakanishi, M.: "Confocal fluorescence microscopy for antibodies against a highly conserved sequence in SH2 domains" Biochem.Biophys.Res.Commun. 223. 245-249 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ohyama, N., Furuno, T., Nakanishi, M.: "Crossbridge rigidity acts differently on・mIgM and IgE receptor-mediated calcium signals" Bioimages. 4. 157-159 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1996 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Torigoe, C., Nakanishi, N.: "Quantitative and realtime correlaion between receptor aggregation and intracellular calcium transduction" Immunology Letters. 49. 169-174 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Furuno, T., Nakanishi, M.: "Surface expression of CD63 antigen (AD1 antigen) in P815 mastocytoma cells by transfected IgE receptors" Biochemical and Biophysical Research Communication. 219. 740-744 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe, T., Furuno, T.: "Confocal fluorescence microscopy for antibodies against a highly conserved sequence in SH2 domains" Biochemical and Biophysical Research Communication. 223. 245-249 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] Ohyama, N., Furuno, T.: "Crossbridge rigidity acts differently on mIgM and IgE receptormediated calcium signals" Bioimages. 4. 157-159 (1996)

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] 古野忠秀: "見る技術(蛋白質核酸酵素増刊号)" 共立出版(印刷中),

    • 関連する報告書
      1996 実績報告書
  • [文献書誌] 鳥越 智香子: "Quantitative and realtime correlation between receptor aggregation and intracellular calcium signal transduction." Immunology Letters. (発表予定).

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書

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公開日: 1995-04-01   更新日: 2016-04-21  

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