| 研究課題/領域番号 |
07680802
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
発生生物学
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
岩尾 康宏 山口大学, 理学部, 教授 (10144916)
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| 研究期間 (年度) |
1995 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1996年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1995年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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| キーワード | 受精 / イモリ / 精子星状体 / 微小管 / 多精受精 / アフリカツメガエル / 精子核 / Caイオン / 細胞周期 / 両生類 |
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| 研究概要 |
イモリは生理的多精受精をおこない、正常受精時に複数の精子が卵内に進入する。しかし、1つの精子核のみが核と融合して発生し、他の精子核は第一卵割前に退化する。今回の研究では、精子核の移動に役立っていると考えられる精子星状体(微小管)の形成と分布の分子的調節機構を明らかにした。とくに、植物半球の細胞質中では、動物半球に比べ、微小管の形成が不完全で、精子星状体の大きさが極端に小さい。これが植物半球の精子が移動できない主原因であると考えられ、この微小管重合を調節している細胞質因子をin vitroでの微小管重合システムを用いて解析した。これまでに、イモリ卵を受精後のいろいろな時間に固定し、坑チューブリン抗体を用いて蛍光抗体染色をおこなった。卵を共焦点レーザー顕微鏡で詳しく観察すると、精子星状体は動物半球ではよく発達するが、植物半球では小さく、接合核がM期になっても間期様の発達した微小管が見られた。また、イモリの精子星状体は、ツメガエルのものと比べ、極めて小さいが、イモリ精子とツメガエル卵との交雑受精卵では星状体は大きくなる。反対に、ツメガエル精子の星状体はイモリ卵中では小さな星状体をつくることがわかった。これは、精子星状体の大きさは卵細胞質によって調節さられており、小さな星状体が多精卵中での精子の移動に役立っていると考えられる。In vitroでの微小管重合を調べるため、ツメガエル未受精卵から細胞質分画を抽出して、重合用緩衝液中でイモリまたはツメガエルの除膜精子核と混合して、それぞれの精子中心体の微小管重合能を調べるアッセイ系を確立した。一方、イモリ受精卵内でCaイオンの濃度変化をエクオリンを用いて測定し、その変動が精子星状体での微小管重合と関係することが明らかとなった。
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