|
1.関節軟骨細胞に対するIL-6の作用
生後4週齢のニュージーランドウサギの膝関節より分離した関節軟骨細胞を、直径6mmのコラーゲンコートプレートに1.5万個播種し、10%牛胎仔血清を含むαMEM培地にて培養した。培養系のコンフルエント後、0.01ng/mlから1ng/mlのIL-6を24時間添加して細胞増殖とプロテオグリカン(PG)合成に対する影響を検討した。この結果1ng/mlのIL-6は^3HチミジンのDNAへの取り込みを、コントロールの70%に、^<35>S硫酸のグリコサミノグリカンへの取り込みをコントロールの58%に抑制した。
コンフルエントより24時間、^<35>S硫酸にてグリコサミノグリカンをプレラベルしPGの分解に対するIL-1βとIL-6の作用について検討した。プレラベル後より8日間、1pg/mlのIL-1βを添加すると培地中へのPGの放出が亢進し、細胞層のPG量はコントロールの52%に低下した。単独で10pg/mlのIL-6を添加してもPG分解に影響しなかったが、IL-1βとの同時添加で、IL-6βのPG分解を促進し、添加8日後のPG量はコントロールの45%に減少した。
2.成長板軟骨細胞に対するIL-6の作用
ウサギ肋軟骨より成長板軟骨細胞を分離し、上記と同様に培養した。培養成長板軟骨細胞に対するIL-6を検討したところ、0.01ng/mlから10ng/mlのIL-6は成長板軟骨細胞の増殖とPG産生に影響することなく、濃度依存性にALPase活性を促進(1ng/mlのIL-6でコントロールの1.7倍)することが判明した。次に、コンフルエントより28日間、各濃度のIL-6を添加して、^<45>Caの細胞外基質不溶画分への取り込みを測定したところ、10ng/mlのIL-6は^<45>Caの取り込みをコントロールの1.6倍に増加し、細胞外基質のカルシウム含量はコントロールの1.2倍に増加した。
|
